[發(fā)明專利]一種預(yù)示和鑒定雞腹脂重的分子標(biāo)記方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201911031119.4
• 申請(qǐng)日: 2019-10-28
• 公開（公告）號(hào): CN110578008B
• 公開（公告）日: 2023-03-31
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張慧;于家強(qiáng);李輝;楊莉莉;曹志平;欒鵬;李玉茂
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): C12Q1/6888
• 分類號(hào): C12Q1/6888;C12Q1/6858
• 代理公司: 哈爾濱市陽光惠遠(yuǎn)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 23211
• 代理人: 鄧宇

本發(fā)明公開了一種預(yù)示和鑒定雞腹脂重的分子標(biāo)記方法，屬于分子標(biāo)記方法技術(shù)領(lǐng)域?yàn)榱私鉀Q無法從表型上對(duì)雞腹脂重進(jìn)行判斷，本發(fā)明提供了一種預(yù)示和鑒定雞腹脂重的分子標(biāo)記方法，具體方案是根據(jù)雞TCF21基因SNP位點(diǎn)g.1033GA上下游394bp序列設(shè)計(jì)引物，再根據(jù)所得引物進(jìn)行雞基因組DNA的PCR擴(kuò)增，之后利用限制性內(nèi)切酶對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行酶切，再對(duì)酶切產(chǎn)物進(jìn)行電泳分離，獲得肉雞腹脂重的標(biāo)記基因型。本發(fā)明所提供的方法具有操作簡(jiǎn)單、費(fèi)用低、精確度高的特點(diǎn)，可進(jìn)行自動(dòng)化檢測(cè)，是一種有效的分子標(biāo)記育種手段，可大幅度加快雞的育種進(jìn)程。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種預(yù)示和鑒定雞腹脂重的分子標(biāo)記方法，屬于分子標(biāo)記方法技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

肉雞是人類最普遍飼養(yǎng)的家禽，上世紀(jì)五十年代以來，育種企業(yè)依賴于表型選擇的方法對(duì)肉雞生長(zhǎng)速度和產(chǎn)肉量性狀進(jìn)行了選擇，已經(jīng)使肉雞的生產(chǎn)性能得到了顯著提升，但是伴隨著肉雞生長(zhǎng)速度的快速提升，一些生理性不適應(yīng)癥等負(fù)面問題隨之出現(xiàn)，比如腹脂蓄積過多、腹水綜合癥、腿部生長(zhǎng)發(fā)育疾病、肉雞免疫力下降、猝死癥等，這些問題給肉雞養(yǎng)殖企業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。肉雞適量的腹脂沉積是機(jī)體生理所必需的，然而，過量的腹脂沉積則會(huì)導(dǎo)致肥胖、高血壓等疾病，并且會(huì)增加飼養(yǎng)成本，因此，選育低脂節(jié)糧型肉雞配套系已經(jīng)成為世界范圍內(nèi)肉雞育種的重要奮斗目標(biāo)之一。

腹脂的過度沉積會(huì)降低肉仔雞飼料轉(zhuǎn)化效率，因?yàn)槌练e單位重量的脂肪比沉積相同質(zhì)量的肌肉多消耗三倍的能量，而且肉種雞過胖會(huì)影響產(chǎn)蛋率、受精卵、孵化率等繁殖性狀。肉雞的腹脂沉積主要由遺傳、營養(yǎng)、環(huán)境因素影響，而從長(zhǎng)遠(yuǎn)來看，解決腹脂過度沉積最有效的方法是遺傳手段。另外，有文獻(xiàn)報(bào)道，肉雞的生長(zhǎng)速度與生理適應(yīng)性狀呈負(fù)相關(guān)，所以應(yīng)用傳統(tǒng)的表型選擇同時(shí)提高生長(zhǎng)速度和改善肉雞生理適應(yīng)性狀是困難的，通過分子標(biāo)記輔助選擇可以為解決這一矛盾提供新思路。肉雞大多數(shù)重要經(jīng)濟(jì)性狀都屬于數(shù)量性狀，而數(shù)量性狀不僅受許多微效基因調(diào)控，而且還有可能受到一個(gè)或幾個(gè)主效基因控制，所以將分子遺傳標(biāo)記育種與傳統(tǒng)表型選擇相結(jié)合能極大提高育種效率，加快育種進(jìn)展。近年來，隨著分子遺傳學(xué)的迅猛發(fā)展，遺傳標(biāo)記逐漸被應(yīng)用于畜禽的標(biāo)記輔助選擇，此項(xiàng)技術(shù)可大大提高育種效率、縮短世代間隔。在眾多的分子標(biāo)記中，關(guān)于單核苷酸多態(tài)性(singlenucleotide polymorphism,SNP)標(biāo)記輔助選擇的研究最多，也是最具前景的分子遺傳標(biāo)記，因此開展與肉雞重要經(jīng)濟(jì)性狀相關(guān)基因多態(tài)性的研究具有現(xiàn)實(shí)意義。

目前為止，尚未發(fā)現(xiàn)有以TCF21基因g.1033GA位點(diǎn)基因型作為分子標(biāo)記對(duì)雞腹脂重進(jìn)行選擇的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

為了解決無法從表型上對(duì)雞腹脂重進(jìn)行判斷，本發(fā)明提供了一種預(yù)示和鑒定雞腹脂重的分子標(biāo)記方法，所采取的技術(shù)方案如下：

1)根據(jù)雞TCF21基因SNP位點(diǎn)g.1033GA上下游394bp序列設(shè)計(jì)引物TCF21-F和TCF21-R，獲得擴(kuò)增引物；

2)提取雞的基因組DNA；

3)利用步驟1)所得的擴(kuò)增引物以步驟2)提取的DNA為模板，進(jìn)行雞基因組DNA的PCR擴(kuò)增，獲得擴(kuò)增產(chǎn)物；

4)利用限制性內(nèi)切酶HinP1I對(duì)步驟3)所得的擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行酶切，獲得酶切產(chǎn)物；

5)利用瓊脂糖凝膠對(duì)步驟4)所得的酶切產(chǎn)物進(jìn)行電泳分離，根據(jù)電泳分離結(jié)果進(jìn)行基因型判定，比較各基因型對(duì)應(yīng)的雞的腹脂重，確定雞的腹脂重標(biāo)記基因型，即完成預(yù)示和鑒定雞腹脂重；

步驟1)中所述引物TCF21-F序列如SEQ ID No：1所示；所述引物TCF21-R如SEQ IDNo：2所示；