[發明專利]一種預示和鑒定雞腹脂重的分子標記方法

有效

• 申請號: 201911031119.4
• 申請日: 2019-10-28
• 公開（公告）號: CN110578008B
• 公開（公告）日: 2023-03-31
• 發明（設計）人: 張慧;于家強;李輝;楊莉莉;曹志平;欒鵬;李玉茂
• 申請（專利權）人: 東北農業大學
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;C12Q1/6858
• 代理公司: 哈爾濱市陽光惠遠知識產權代理有限公司 23211
• 代理人: 鄧宇

1.一種預示和鑒定雞腹脂重的分子標記方法，其特征在于，步驟如下：

1)根據雞TCF21基因SNP位點g.1033GA上下游394bp序列設計引物TCF21-F和TCF21-R，獲得擴增引物；

2)提取雞的基因組DNA；

3)利用步驟1)所得的擴增引物以步驟2)提取的DNA為模板，進行雞基因組DNA的PCR擴增，獲得擴增產物；

4)利用限制性內切酶HinP1I對步驟3)所得的擴增產物進行酶切，獲得酶切產物；

5)利用瓊脂糖凝膠對步驟4)所得的酶切產物進行電泳分離，根據電泳分離結果進行基因型判定，比較各基因型對應的雞的腹脂重，確定雞的腹脂重標記基因型，即完成預示和鑒定雞腹脂重；

步驟1)中所述引物TCF21-F序列如SEQ ID No：1所示；所述引物TCF21-R如SEQ ID No：2所示；

步驟5)中所述基因型判定標準：①電泳呈現一條帶，大小為394bp，則雞TCF21基因位點g.1033GA為A堿基，將其命名為AA基因型；②電泳呈現一條帶，大小為369bp，則雞TCF21基因位點g.1033GA為G堿基，將其命名為GG基因型；③電泳呈現兩條帶，大小分別為394bp和369bp，則該位點處于雜合狀態，將其命名為AG基因型；所述雞腹脂重標記基因型為GG。

2.根據權利要求1所述的一種預示和鑒定雞腹脂重的分子標記方法，其特征在于，步驟3)所述的PCR擴增，是25μl反應體系，由下列成分組成：

PCR擴增條件為：94℃變性5min；94℃ 30sec，60℃ 30sec，72℃ 30sec，40個循環；72℃延伸10min。

3.根據權利要求1或2所述的一種預示和鑒定雞腹脂重的分子標記方法，其特征在于，步驟4)所述的酶切，是10μl反應體系，由下列成分組成：3～5U的內切酶，1μl的Buffer，0.3～0.5μg的PCR產物，添加去離子水至10μl；37℃反應3小時。