[發明專利]一種基于FESI-MCDS-MEKC檢測中性物質含量的方法

有效

• 申請號: 201911031010.0
• 申請日: 2019-10-28
• 公開（公告）號: CN111007160B
• 公開（公告）日: 2022-07-01
• 發明（設計）人: 楚楚;劉彩婧;連琳敏;李璟;顏繼忠
• 申請（專利權）人: 浙江工業大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/08;G01N30/64
• 代理公司: 杭州天勤知識產權代理有限公司 33224
• 代理人: 陳格

本發明公開了一種基于FESI?MCDS?MEKC檢測中性物質含量的方法，利用膠束電動色譜模式(MEKC)下的場放大進樣(FESI)和膠束溶劑堆積技術(MCDS)的聯用技術來分析測定復雜樣品基質中中性分析物的方法，具體包括：先分別對毛細管和樣品進行預處理，再基于FESI?MCDS?MEKC進行電泳分析，最后繪制酸中性物質的標準曲線，定量分析中性物質的含量，所述的中性物質為酸棗仁皂苷A或酸棗仁皂苷B。本發明進一步提高了CE檢測中性分析物的靈敏度，拓展了CE在中性分析物方面的應用。該方法簡便、重現性好、綠色環保，相比于已報道的方法，靈敏度得到了顯著提高，富集倍數為140?152倍。

技術領域

本發明涉及毛細管電泳分析領域，具體涉及一種在膠束電動色譜模式 (MEKC)下的場放大進樣(FESI)和膠束溶劑堆積技術(MCDS)的聯 用技術來分析測定復雜樣品基質中中性分析物的方法。

背景技術

毛細管電泳(capillary electrophoresis,CE)是近年來發展最快的高效 分離分析技術之一，具有操作簡單、分離效率高、分析速度快、樣品消耗 少、分離模式多等優點，在藥物、食品、環境、生命科學等領域有廣泛的 應用。但是由于CE進樣體積小，檢測光程短，導致其檢測靈敏度低，限 制了它在痕量物質分析方面的應用。為了解決這一問題，無需對儀器進行 改造而僅通過對樣品、背景緩沖溶液的組成以及進樣程序進行適當調控的 在線富及技術越來越受到關注。

中性物質在電解液中不帶電，不能在常規的區帶毛細管電泳中分離， 是毛細管電泳分離的難題。膠束電動毛細管色譜(MEKC)則通過在背景 緩沖液中加入膠束從而完成了中性分析物的分離測定。由于中藥成分復 雜、含量低微，因此，香豆素類、皂苷類、萜類等中性物質的定量分析仍 然受到極大限制。為了提高中性物質的檢測靈敏度，基于MEKC的在線富集方法逐漸發展起來，如吹掃技術(Sweeping)、場放大進樣-反向膠束 遷移技術(FESI-RMM)和膠束環糊精堆積技術(MCDS)等。但是這些技術的 富集倍數大多只有幾倍-幾十倍，其靈敏度仍有待提高。

為了進一步提高CE檢測中性分析物的檢測靈敏度，本實驗以酸棗仁 皂苷為研究模型，通過對分離和富集條件的優化，首次建立了在膠束電動 色譜模式下的場放大進樣和膠束環糊精堆積聯用的在線富集技術，為檢測 復雜基質樣品中的痕量中性分析物提供了新的選擇和思路。

發明內容

本發明旨在提供一種快速、靈敏、綠色環保的測定復雜樣品基質中酸 棗仁皂苷A和酸棗仁皂苷B含量的方法，該方法操作簡便、重現性好、 綠色環保，顯著提高了檢測靈敏度。

本發明的技術方案如下：

一種基于FESI-MCDS-MEKC的兩步策略檢測中性物質含量的方法， 包括：先分別對毛細管和樣品進行預處理，再基于FESI-MCDS-MEKC進 行電泳分析，最后繪制中性物質的標準曲線，定量分析中性物質的含量， 其特征在于，所述的中性物質為酸棗仁皂苷A或酸棗仁皂苷B；

所述電泳分析的條件為：以40～120mmol/L十二烷基硫酸鈉 -10％～40％甲醇-40～60mmol/L磷酸-5～15mmol/L磷酸二氫鈉為緩沖液， 先40～60mbar壓力進環糊精溶液，再40～60mbar壓力進純水，最后-5～-10 kV電壓進含十二烷基硫酸鈉的樣品溶液，分離電壓為-15～-25kV，溫度為 20～30℃，檢測波長為203nm。