[發(fā)明專利]一種米曲霉及利用米曲霉發(fā)酵生產(chǎn)低聚果糖的方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201911022662.8
• 申請日: 2019-10-25
• 公開（公告）號: CN110734862A
• 公開（公告）日: 2020-01-31
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 宋建民;王德海;宛榮生;張琴;王頌;黃祥君
• 申請（專利權(quán)）人: 安徽民禎生物工程有限公司
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12P19/04;C12P19/12;C12P19/00;C12R1/69
• 代理公司: 11411 北京聯(lián)瑞聯(lián)豐知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙)
• 代理人: 錢紅雪

1.一種米曲霉菌株，是從中國安徽省淮北地區(qū)天然黃豆醬中分離得到的，命名為米曲霉(Aspergillus oryzae)MZ30，菌種保藏號為CGMCC No.18106。

2.一種利用米曲霉發(fā)酵生產(chǎn)低聚果糖的方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)將白糖加水配制成白糖溶液；

取菌種保藏號為CGMCC No.18106的米曲霉(Aspergillus oryzae)MZ30在無菌條件下接種到活化培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，搖床轉(zhuǎn)速120r/min培養(yǎng)溫度為28℃，培養(yǎng)時間為48h；

2)向步驟1)得到的白糖溶液中加入瓊脂、酵母膏、K₂HPO₄、MgSO₄、NaCl和NaH₂PO₄，混合均勻后將混合料的pH值調(diào)節(jié)至6～7，在溫度115℃下滅菌15min，得到發(fā)酵培養(yǎng)基；再接入步驟1)得到的菌種保藏號為CGMCC No.18106的米曲霉(Aspergillus oryzae)MZ30的菌體溶液，在25～35℃下發(fā)酵30～50h，得到發(fā)酵液；

3)去除步驟2)得到的發(fā)酵液中的菌體，并加入活性炭脫色，得到上清液；

4)將步驟3)得到的上清液依次通過超濾膜、陽離子交換樹脂、陰離子交換樹脂，收集洗脫液；

5)將步驟4)得到的洗脫液進(jìn)行濃縮、干燥，即得低聚果糖。

3.如權(quán)利要求2所述的利用米曲霉發(fā)酵生產(chǎn)低聚果糖的方法，其特征在于，步驟2)中，發(fā)酵培養(yǎng)基中米曲霉(Aspergillus oryzae)MZ30菌體溶液的接種量為發(fā)酵培養(yǎng)基體積的5～10％。

4.如權(quán)利要求2所述的利用米曲霉發(fā)酵生產(chǎn)低聚果糖的方法，其特征在于，每升活化培養(yǎng)基中各組分的質(zhì)量克數(shù)為玉米淀粉20～30，酵母浸膏5～8，KNO₃1～1.5，K₂HPO₄ 0.4～0.6，MgCl 0.5～0.7，NaCl 0.5～0.8，F(xiàn)eSO₄·7H₂O 0.01～0.02，瓊脂15～20。

5.如權(quán)利要求2所述的利用米曲霉發(fā)酵生產(chǎn)低聚果糖的方法，其特征在于，每升發(fā)酵培養(yǎng)基中各組分的質(zhì)量克數(shù)為白糖30～35、瓊脂4～7、酵母膏10～15、K₂HPO₄ 1～2、MgSO₄ 1～2、NaCl 1～2和NaH₂PO₄ 0.5～1。

6.如權(quán)利要求2所述的利用米曲霉發(fā)酵生產(chǎn)低聚果糖的方法，其特征在于，步驟2)中，接入米曲霉(Aspergillus oryzae)MZ30的同時還加有酶激活劑，酶激活劑為氯化鋅或谷胱甘肽。

7.如權(quán)利要求6所述的利用米曲霉發(fā)酵生產(chǎn)低聚果糖的方法，其特征在于，酶激活劑與白糖的質(zhì)量比為(0.05～0.1)：100。

8.如權(quán)利要求2所述的利用米曲霉發(fā)酵生產(chǎn)低聚果糖的方法，其特征在于，步驟3)具體為，將發(fā)酵液經(jīng)切向流超濾，切向流超濾采用的超濾膜孔徑為0.2μm去除菌體，再加入活性炭脫色，得到上清液。

9.如權(quán)利要求2所述的利用米曲霉發(fā)酵生產(chǎn)低聚果糖的方法，其特征在于，步驟4)中，超濾膜的截留分子量為300～500Da。

10.如權(quán)利要求2所述的利用米曲霉發(fā)酵生產(chǎn)低聚果糖的方法，其特征在于，步驟4)中，陰離子交換樹脂為D001FD大孔強(qiáng)酸性苯乙烯陽離子交換樹脂，陽離子交換樹脂為D750大孔強(qiáng)堿性丙烯酸陰離子交換樹脂。