[發明專利]以納米金為顯色探針的磷酸吡哆醛快速測定方法

有效

• 申請號: 201911019849.2
• 申請日: 2019-10-24
• 公開（公告）號: CN110646417B
• 公開（公告）日: 2021-10-15
• 發明（設計）人: 鄧豪華;陳偉;黃開源;彭花萍;何少斌
• 申請（專利權）人: 福建醫科大學
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78;G01N21/31
• 代理公司: 福州智理專利代理有限公司 35208
• 代理人: 王義星

本發明公開一種納米金為顯色探針的磷酸吡哆醛快速測定方法，其特征是利用磷酸吡哆醛與納米金作用，導致納米金聚集而表現出溶液顏色和紫外?可見吸收光譜特征的變化，來測定磷酸吡哆醛濃度。當目視觀察顏色特征時，隨著磷酸吡哆醛濃度的逐漸增大（0~0.5μmol/L），巰基乙胺?納米金的顏色由酒紅色→粉紅色→紫色→藍色進行變化；當測定吸光度比值A₇₀₀/A₅₂₅時，磷酸吡哆醛濃度在0.25~0.5μmol/L范圍內變化時，巰基乙胺?納米金的吸光度比值A₇₀₀/A₅₂₅隨著磷酸吡哆醛濃度的增加而增大。

技術領域

本發明涉及以納米金為顯色探針的磷酸吡哆醛含量快速測定方法，屬于分析化學和納米技術領域。

背景技術

金納米粒子由于其易于制備和生物功能化、優良的生物穩定性和獨特的光譜特性已受到廣泛的關注。金納米粒子的表面等離子吸收帶位于電磁波譜的可見光區，并受納米聚集體的形貌的影響。典型的膠體納米金粒子為酒紅色，而它們的聚集體則呈現紫色或藍色，這是由于納米金的表面等離子吸收帶向長波長移動所致。基于這一原理的方法可用于細胞、蛋白質、DNA、金屬離子等各種分析物的檢測。

磷酸吡哆醛又稱磷酸-5’-吡哆醛，是維生素B₆的輔酶形式，參與氨基酸代謝中的轉氨基作用，它主要用于生化研究，孕甾酮特性的結構修飾和酶抑制劑等。在醫藥方面，磷酸吡哆醛是維生素B₆的主要藥物原料。因此，發展快速、靈敏檢測的磷酸吡哆醛方法，具有十分重要的意義。迄今為止，包括電化學法、熒光光譜法和高效液相色譜法等各種技術已被應用于磷酸吡哆醛的檢測。雖然大多數的上述技術，可以靈敏、選擇性地檢測磷酸吡哆醛，但是精密儀器和訓練有素的操作人員的需求限制了它們在常規檢測中的應用。

本發明以巰基乙胺-納米金作為顯色探針，提供了一種快速、簡便、靈敏的磷酸吡哆醛檢測新方法。

發明內容

本發明的目的是以巰基乙胺-納米金為顯色探針，利用納米金與磷酸吡哆醛相互作用后其分散狀態的變化，提供了一種快速、簡便、靈敏的磷酸吡哆醛測定方法。

為了實現上述目的，本發明采用以下技術方案：

一種納米金為顯色探針的磷酸吡哆醛快速測定方法，其特征是利用磷酸吡哆醛與納米金作用，導致納米金聚集而表現出溶液顏色和紫外-可見吸收光譜特征的變化，來測定磷酸吡哆醛濃度；利用納米金溶液顏色的變化以判斷磷酸吡哆醛的濃度；所使用納米金由以下步驟制備得到：首先，取400 μL濃度為213 mmol/L的巰基乙胺鹽酸鹽和2.23 mL濃度為10 mg/mL的HAuCl₄加入到含37.5 mL水的燒杯中，室溫攪拌反應20 min；結束后，向上述反應液中加入10 μL濃度為10 mmol/L的NaBH₄，而后繼續室溫攪拌反應30 min，即得巰基乙胺-納米金粗品；將所制得的巰基乙胺-納米金粗品用截留分子量為7000的透析袋進行純化處理，得到巰基乙胺-納米金純品；將所得巰基乙胺-納米金純品密封避光，置于4 ℃冰箱保存、備用。

一種納米金為顯色探針的磷酸吡哆醛快速測定方法，其特征是其特征是利用磷酸吡哆醛與納米金作用，導致納米金聚集而表現出溶液顏色和紫外-可見吸收光譜特征的變化，來測定磷酸吡哆醛濃度；利用納米金在700 nm與525 nm波長處的吸光度比值（A₇₀₀/A₅₂₅）變化以測定磷酸吡哆醛的濃度；所使用納米金由以下步驟制備得到：首先，取400 μL濃度為213 mmol/L的巰基乙胺鹽酸鹽和2.23 mL濃度為10 mg/mL的HAuCl₄加入到含37.5 mL水的燒杯中，室溫攪拌反應20 min；結束后，向上述反應液中加入10 μL濃度為10 mmol/L的NaBH₄，而后繼續室溫攪拌反應30 min，即得巰基乙胺-納米金粗品；將所制得的巰基乙胺-納米金粗品用截留分子量為7000的透析袋進行純化處理，得到巰基乙胺-納米金純品；將所得巰基乙胺-納米金純品密封避光，置于4 ℃冰箱保存、備用。