[發(fā)明專利]寡核苷酸的合成方法、合成裝置

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201911017315.6
• 申請(qǐng)日: 2019-10-24
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN112442101A
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-03-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 商逸璇;萬(wàn)江雪;徐君;趙遠(yuǎn)錦
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 華為技術(shù)有限公司
• 主分類號(hào): C07H21/04
• 分類號(hào): C07H21/04;C07H21/00;C07H1/00
• 代理公司: 北京龍雙利達(dá)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11329
• 代理人: 張振;王君

本申請(qǐng)?zhí)峁┝艘环N寡核苷酸的合成方法、合成裝置。該方法包括：在第一微陣列底板的親水區(qū)加入第一化合物，通過(guò)親水區(qū)中的羥基和第一化合物的羧基進(jìn)行反應(yīng)，得到包括羧基的第二化合物，并在該親水區(qū)通過(guò)第二化合物和帶有羥基的胸苷進(jìn)行反應(yīng)，在該親水區(qū)得到合成的寡核苷酸。上述技術(shù)方案可以僅對(duì)底板進(jìn)行一次修飾，即可合成寡核苷酸，能夠提高寡核苷酸的合成效率，降低寡核苷酸的制作成本，使得整個(gè)操作流程耗時(shí)較短。

技術(shù)領(lǐng)域

本申請(qǐng)涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，并且更具體地，涉及寡核苷酸的合成方法、合成裝置。

背景技術(shù)

寡核苷酸是近年來(lái)研究和了解新基因功能的重要載體物質(zhì)，實(shí)現(xiàn)寡核苷酸合成具有重要意義及良好的市場(chǎng)前景。固相合成法是一種將反應(yīng)物連接在一個(gè)不溶性的固相載體上的一種合成方法。

目前，亞磷酰胺單體固相合成法是主流的一種合成寡核苷酸的方法。現(xiàn)有的亞磷酰胺單體固相合成法中，需要對(duì)合成寡核苷酸的固相載體進(jìn)行修飾，同時(shí)，還需要對(duì)亞磷酰胺單體進(jìn)行琥珀酸修飾。現(xiàn)有技術(shù)中，需要進(jìn)行兩次修飾，使得整個(gè)操作流程耗時(shí)較長(zhǎng)，制作成本較高，合成效率較低。

因此，如何更高效的合成寡核苷酸，提高寡核苷酸的合成效率成為當(dāng)前亟需要解決的問(wèn)題。

發(fā)明內(nèi)容

本申請(qǐng)?zhí)峁┮环N寡核苷酸的合成方法、合成裝置，能夠提高寡核苷酸的合成效率，降低寡核苷酸的制作成本，使得整個(gè)操作流程耗時(shí)較短。

第一方面，提供了一種寡核苷酸的合成方法，該方法包括：對(duì)底板進(jìn)行處理，得到第一微陣列底板，該底板包括親水區(qū)，在該親水區(qū)加入第一化合物，通過(guò)親水區(qū)中的羥基和第一化合物的羧基進(jìn)行反應(yīng)，得到包括羧基的第二化合物，并在該親水區(qū)通過(guò)第二化合物和帶有羥基的胸苷進(jìn)行反應(yīng)，在該親水區(qū)得到合成的寡核苷酸。

應(yīng)理解，該親水區(qū)中包括羥基，該第一化合物和第二化合物均為包括羧基的化合物。

上述技術(shù)方案中，通過(guò)在第一微陣列底板的親水區(qū)加入第一化合物對(duì)該底板進(jìn)行修飾，使得該第一微陣列底板上暴露出羧基，從而可以通過(guò)該羧基直接與胸苷中的羥基進(jìn)行反應(yīng)，合成寡核苷酸。本申請(qǐng)中僅對(duì)底板進(jìn)行一次修飾，即可合成寡核苷酸，能夠提高寡核苷酸的合成效率，降低寡核苷酸的制作成本，使得整個(gè)操作流程耗時(shí)較短。

在一種可能的實(shí)現(xiàn)方式中，所述方法還包括：在所述第一微陣列底板的親水區(qū)加入溴異丁酰溴BIBB溶液，并在所述親水區(qū)中與所述第一化合物發(fā)生原子轉(zhuǎn)移自由基聚合ATRP反應(yīng)，生成所述第二化合物。

上述技術(shù)方案中，通過(guò)ATRP反應(yīng)實(shí)現(xiàn)親水區(qū)的一個(gè)羥基上可以枝接多個(gè)羧基，該多個(gè)羧基可以合成多個(gè)寡核苷酸，從而提高寡核苷酸的合成效率。

在另一種可能的實(shí)現(xiàn)方式中，所述第一化合物為聚丙烯酸。

上述技術(shù)方案中，聚丙烯酸的結(jié)構(gòu)較簡(jiǎn)單，從而可以更容易實(shí)現(xiàn)寡核苷酸的合成。

在另一種可能的實(shí)現(xiàn)方式中，所述方法還包括：對(duì)所述第二微陣列底板的親水區(qū)進(jìn)行氨水解處理，得到寡核苷酸和帶有氨基的第三微陣列底板。

上述技術(shù)方案中，可以通過(guò)氨水解的方式將寡核苷酸從底板的親水區(qū)中剝離，得到寡核苷酸。

在另一種可能的實(shí)現(xiàn)方式中，所述方法還包括：在所述帶有氨基的第三微陣列底板上加入碳酸鈉-甲醇溶液，得到所述第一微陣列底板。

上述技術(shù)方案中，可以通過(guò)加入碳酸鈉-甲醇溶液得到第一微陣列底板，在下一次合成寡核苷酸的過(guò)程中，可以直接使用第一微陣列底板中親水區(qū)中包括的羥基進(jìn)行合成，避免制作包括親水區(qū)的第一微陣列底板，實(shí)現(xiàn)第一微陣列底板的重復(fù)利用。