[發(fā)明專利]一種攜IR-780的靶向聲釋氧納米微聚體及其制備方法和應用

有效

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• 申請日: 2019-10-21
• 公開（公告）號: CN110859971B
• 公開（公告）日: 2022-04-08
• 發(fā)明（設計）人: 程文;吳博林;荊慧;韓雪;孫一欣
• 申請（專利權）人: 哈爾濱醫(yī)科大學
• 主分類號: A61K49/22
• 分類號: A61K49/22;A61K49/00;A61K41/00;A61P35/00
• 代理公司: 北京科龍寰宇知識產權代理有限責任公司 11139
• 代理人: 孫皓晨

本發(fā)明公開了一種攜IR?780的靶向聲釋氧納米微聚體及其制備方法和應用，以納米微泡為載體，以O₂為內核，以IR?780碘化物為聲敏劑，制備攜IR?780的靶向聲釋氧納米微聚體，使其具有聲動力治療和超聲?熒光多模態(tài)成像的多重功能。通過超聲靶向微泡破壞技術(UTMD)介導氧氣靶向投遞，造成組織局部富氧環(huán)境，促進SDT誘導ROS產生，提高聲動力治療效能，還可進行實時監(jiān)控，實現肝癌的靶向聲動力治療的可視化、精確化和高效性，為肝癌熱消融治療提供一種新手段。

技術領域

本發(fā)明涉及一種攜IR-780的靶向聲釋氧納米微聚體及其制備方法和應用，特別涉及一種基于IR-780碘化物、且具備超聲-熒光雙模態(tài)成像功能的肝癌靶向聲釋氧微聚體治療劑及其制備方法和應用。

背景技術

肝癌是威脅人類健康的一大殺手，被稱為“癌中之王”。發(fā)病率呈逐年上升趨勢，據統(tǒng)計，每年全球肝癌發(fā)病率位居惡性腫瘤發(fā)病率的第五位，約55％發(fā)生在中國，而其平均生存時間僅為6-16個月。目前肝癌以手術治療為主，但只有9％-29％的患者能夠手術切除。

熱消融是治療肝癌的一種重要手段，聲動力治療(Sonodynamic therapy，SDT)作為一種非侵入性熱消融技術，是一種治療腫瘤的新療法，可實現癌細胞的選擇性殺傷，降低對正常細胞和組織的損傷。與傳統(tǒng)光動力治療中使用的激光或微波相比，超聲具有適當的組織衰減系數、可聚焦性、穿透性和照射部位的選擇性，對治療腫瘤特別是深部有較強的靶向性和安全性。聲動力治療通過誘導聲敏劑產生大量氧自由基，從而降低線粒體膜電位從而影響許多重要的細胞內生理作用，最終達到誘導細胞凋亡的目的。因此，選擇一種安全、高效的聲敏劑、以及改善腫瘤缺氧微環(huán)境是提高聲動力治療效能的兩個關鍵因素。

IR-780碘化物是脂溶性的陽離子七甲川菁染料，對近紅外光有很強的吸收。IR-780不需要與腫瘤特異性分子連接，自身即可選擇性地高效蓄積在腫瘤細胞的線粒體中，在低頻低強度超聲的輻照下，可在線粒體內產生氧自由基，降低線粒體膜電位從而精準殺傷腫瘤細胞。鑒于IR-780具備以上獨特優(yōu)勢，本發(fā)明將其作為聲敏劑，實現SDT的精準治療，進一步提高治療效能。

微泡既可以作為超聲顯像的造影劑，又可以作為藥物或基因的載體，實現藥物和基因的靶向遞送，是一種無創(chuàng)性、具有組織和器官特異性的藥物運載工具。低頻超聲靶向照射特定區(qū)域內的微泡，可使之破壞、爆破，釋放其攜帶的藥物或基因，使局部藥物或基因含量增多。本發(fā)明使微泡包裹氧氣內核，通過低頻低強度超聲輻照使其爆破釋放氧氣，造成組織局部富氧環(huán)境，促進SDT誘導活性氧(Reactive oxygen species，ROS)產生，提高聲動力治療效能。

發(fā)明內容

本發(fā)明以O₂為內核，以IR-780碘化物為聲敏劑，以磷脂為原料，制備攜IR-780的靶向聲釋氧納米微聚體(IR-780@O₂NP)，使其具有聲動力治療和超聲-近紅外熒光成像雙重功能，可用于制備肝癌靶向聲動力治療劑。聯合低頻低強度超聲輻照介導IR-780的靶向遞送、靶向釋放，利用空化效應和聲孔效應進一步促進IR-780進入腫瘤組織和細胞內部，在局部富氧環(huán)境的條件下，提高聲動力治療能效，以實現肝癌聲動力治療的可視化、精準化和高效性。

具體地，本發(fā)明提供一種攜IR-780的靶向聲釋氧納米微聚體，由以下步驟制備得到：

(1)載氧納米微泡的制備

(1.1)精密稱取15-20mg二硬脂酰磷脂酰膽堿(DSPC)、0.7-1.5mg二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000(DSPE-PEG2000)和0.7-1.5mg生物素化二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000(DSPE-PEG2000-Biotin)置于裝有5-20ml體積比為1：2-4甲醇與二氯甲烷混合物的圓底燒瓶中，室溫下攪拌充分至其完全溶解；

(1.2)使用旋轉蒸發(fā)儀蒸干有機溶劑，再使用去離子水離心洗滌3次，去除殘留的二氯甲烷與甲醇及其他雜質，制備磷脂薄膜；