[發明專利]一種攜IR-780的靶向聲釋氧納米微聚體及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201911001519.0
• 申請日: 2019-10-21
• 公開（公告）號: CN110859971B
• 公開（公告）日: 2022-04-08
• 發明（設計）人: 程文;吳博林;荊慧;韓雪;孫一欣
• 申請（專利權）人: 哈爾濱醫科大學
• 主分類號: A61K49/22
• 分類號: A61K49/22;A61K49/00;A61K41/00;A61P35/00
• 代理公司: 北京科龍寰宇知識產權代理有限責任公司 11139
• 代理人: 孫皓晨

1.一種攜IR-780的靶向聲釋氧納米微聚體，其特征在于，由以下步驟制備得到：

(1)載氧納米微泡的制備

(1.1)精密稱取15-20mg二硬脂酰磷脂酰膽堿、0.7-1.5mg二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000和0.7-1.5mg生物素化二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000置于裝有5-20ml體積比為1：2-4的甲醇與二氯甲烷混合物的圓底燒瓶中，室溫下攪拌充分至其完全溶解；

(1.2)使用旋轉蒸發儀蒸干有機溶劑，再使用去離子水離心洗滌3次，去除殘留的二氯甲烷與甲醇及其他雜質，制備磷脂薄膜；

(1.3)向圓底燒瓶中加入5ml去離子水，45-60℃水浴3分鐘，之后使用超聲分散均質儀乳化5分鐘，使之形成磷脂乳化液；

(1.4)將步驟1.3得到的磷脂乳化液裝入真空密封瓶中，充入過量醫用氧氣，使用超聲震蕩儀震蕩1分鐘，靜置，收集上層浮集微泡，再使用去離子水離心洗滌3次，除去過量的磷脂混合物與其他雜質，得到載氧納米微泡溶液，4℃保存備用；

(2)經生物素化聚乙二醇2000修飾的IR-780碘化物的制備

(2.1)精密稱取25-35mg IR-780碘化物溶于1ml二甲基亞砜中；

(2.2)精密稱取35-60mg的生物素化聚乙二醇2000，溶于5-20ml體積比為1：2-4甲醇與二氯甲烷混合物中；

(2.3)將步驟2.1得到的IR-780碘化物溶液與步驟2.2得到的生物素化聚乙二醇2000溶液混合，使用超聲分散均質儀乳化20-30分鐘，使其螯合成淡綠色乳化液，再向乳化液中加入20ml去離子水，45-60℃水浴10分鐘，再使用去離子水洗滌離心3次，得到經生物素化聚乙二醇2000修飾的IR-780碘化物溶液，4℃保存備用；

(3)攜IR-780的靶向聲釋氧納米微聚體的制備

(3.1)將步驟1得到的載氧納米微泡溶液置于含有200nm濾膜的磷脂擠壓器中，反復擠壓20次以上，使其變為澄清狀；

(3.2)向步驟3.1得到的載氧納米微泡溶液中加入過量親和素，室溫孵育1小時，之后逐滴加入過量的由步驟2得到的經生物素化聚乙二醇2000修飾的IR-780碘化物溶液，輕微吹打使其混勻，室溫下渦旋30min；

(3.3)使用去離子水離心洗滌，清除殘留的親和素和IR-780碘化物，吸取上層淡綠色納米微泡，得到攜IR-780的靶向聲釋氧納米微聚體溶液；

(3.4)將步驟3.2得到的攜IR-780的靶向聲釋氧納米微聚體溶液置于真空冷凍干燥機中凍干至粉末狀，收集攜IR-780的靶向聲釋氧納米微聚體凍干粉，充入醫用純氧氣體，將其密封置于4℃冰箱中保存。

2.根據權利要求1所述的攜IR-780的靶向聲釋氧納米微聚體，其特征在于：

步驟(1.1)中所述二硬脂酰磷脂酰膽堿的用量為18mg，所述二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000的用量為1mg，所述生物素化二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000的用量為1mg；

步驟(1.1)中所述甲醇與二氯甲烷混合物的用量為15ml，甲醇與二氯甲烷的體積比為1：2；

步驟(1.3)中所述的水浴溫度為60℃；

步驟(2.1)中所述IR-780碘化物的用量為32mg；

步驟(2.2)中所述生物素化聚乙二醇2000的用量為50mg；

步驟(2.2)中所述甲醇與二氯甲烷混合物的用量為15ml，甲醇與二氯甲烷的體積比為1：2；

步驟(2.3)中所述的乳化時間為30分鐘；

步驟(2.3)中所述的水浴溫度為60℃。