[發(fā)明專(zhuān)利]一種肉牛繁殖胚胎冷凍保存液及冷凍方法在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201910998213.0 | 申請(qǐng)日： | 2019-10-21 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN110604128A | 公開(kāi)（公告）日： | 2019-12-24 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 張廣志 | 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人： | 內(nèi)蒙古金草原牧業(yè)有限公司 |
| 主分類(lèi)號(hào)： | A01N1/02 | 分類(lèi)號(hào)： | A01N1/02 |
| 代理公司： | 13130 石家莊領(lǐng)皓專(zhuān)利代理有限公司 | 代理人： | 薛琳 |
| 地址： | 010000 內(nèi)蒙古自治區(qū)呼和浩*** | 國(guó)省代碼： | 內(nèi)蒙;15 |
| 權(quán)利要求書(shū)： | 查看更多 | 說(shuō)明書(shū)： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 冷凍 胚胎冷凍保存 肉牛 冷凍保存液 冷凍載體 繁殖 牛血清白蛋白 聚乙烯亞胺 冷凍存活率 細(xì)胞 谷氨酰胺 冷凍保存 胚胎冷凍 山梨糖醇 蔗糖 緩沖液 牛胚胎 平衡液 重量份 平衡 放入 液氮 | ||
1.一種肉牛繁殖胚胎冷凍保存液，其特征在于，所述冷凍保存液由以下重量份的組分組成：
HPES緩沖液40～50份，牛血清白蛋白0.1～0.5份，山梨糖醇2～5份，谷氨酰胺0.01～0.02份，聚乙烯亞胺10～15份，蔗糖20～25份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種肉牛繁殖胚胎冷凍保存液，其特征在于，所述冷凍保存液由以下重量份的組分組成：
HPES緩沖液45份，牛血清白蛋白0.3份，山梨糖醇3份，谷氨酰胺0.015份，聚乙烯亞胺12份，蔗糖23份。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種肉牛繁殖胚胎冷凍保存液，其特征在于，所述聚乙烯亞胺的分子量為70000。
4.一種肉牛繁殖胚胎冷凍方法，其特征在于，包括下述步驟：將準(zhǔn)備冷凍的牛胚胎先在預(yù)平衡液中平衡5～8min，再放入權(quán)利要求1～3任意一項(xiàng)所述的一種肉牛繁殖胚胎冷凍保存液中平衡30～40秒后轉(zhuǎn)移至冷凍載體上，將冷凍載體投入液氮中進(jìn)行冷凍。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種肉牛繁殖胚胎冷凍方法，其特征在于，在將在預(yù)平衡液中平衡5～8min后的牛胚胎放入所述冷凍保存液中前，先將所述冷凍保存液預(yù)熱至37～40℃。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種肉牛繁殖胚胎冷凍方法，其特征在于，所述冷凍載體為OPS。
7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種肉牛繁殖胚胎冷凍方法，其特征在于，所述預(yù)平衡液有以下重量份的組分組成：
HPES緩沖液45份，牛血清白蛋白0.4份，谷氨酰胺0.03份，聚乙烯亞胺15份。
8.據(jù)權(quán)利要求4～7任意一項(xiàng)所述的一種肉牛繁殖胚胎冷凍方法，其特征在于，所述牛胚胎為囊胚、2-細(xì)胞胚胎、4-細(xì)胞胚胎或8-細(xì)胞胚胎。
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