[發(fā)明專利]一種外泌體組合物、其制備方法及應(yīng)用

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910997072.0
• 申請(qǐng)日: 2019-10-20
• 公開（公告）號(hào): CN110559254A
• 公開（公告）日: 2019-12-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張新梅
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 張新梅
• 主分類號(hào): A61K8/99
• 分類號(hào): A61K8/99;A61Q19/00;A61Q7/00;C12N5/0775
• 代理公司: 11429 北京中濟(jì)緯天專利代理有限公司
• 代理人: 周倩羽

1.一種外泌體組合物，其特征在于，包括外泌體和藥學(xué)上可接受的載體。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于，所述外泌體為單層細(xì)胞外泌體、細(xì)胞球外泌體、或二者的組合。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于，所述外泌體來自成纖維細(xì)胞，毛囊乳突細(xì)胞，脂肪干細(xì)胞，胚胎干細(xì)胞，造血干細(xì)胞，臍帶血干細(xì)胞，以及皮膚、脂肪、骨髓來源的間充質(zhì)干細(xì)胞中的一者或多者。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于，所述外泌體中含有外泌體標(biāo)志蛋白CD63，CD81和CD9。

5.一種外泌體的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

將成纖維細(xì)胞、毛囊乳突細(xì)胞、脂肪干細(xì)胞、胚胎干細(xì)胞、造血干細(xì)胞、臍帶血干細(xì)胞、或者皮膚、脂肪、骨髓來源的間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行低代數(shù)細(xì)胞的貼壁擴(kuò)大培養(yǎng)，至細(xì)胞融合率達(dá)90％以上后，收集單層細(xì)胞外泌體。

6.一種外泌體的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

將經(jīng)多次傳代后呈現(xiàn)衰老表型的皮膚成纖維細(xì)胞、毛囊乳突細(xì)胞、脂肪干細(xì)胞、胚胎干細(xì)胞、造血干細(xì)胞、臍帶血干細(xì)胞、或者皮膚、脂肪、骨髓來源的間充質(zhì)干細(xì)胞傳代至超低吸附培養(yǎng)瓶中，培養(yǎng)成細(xì)胞球，收集細(xì)胞球外泌體。

7.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的方法，其特征在于，通過以下方法收集單層細(xì)胞外泌體或細(xì)胞球外泌體：

將單層細(xì)胞或細(xì)胞球置于無血清的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，收集上清液并除去細(xì)胞及其他雜質(zhì)，得到單層細(xì)胞外泌體或細(xì)胞球外泌體。

8.一種外泌體在制備用于護(hù)膚或生發(fā)的皮膚美容產(chǎn)品中的用途，其特征在于，所述外泌體在所述皮膚美容產(chǎn)品中的濃度為1-1000μg/ml。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的用途，其特征在于，所述皮膚美容產(chǎn)品為乳劑、霜?jiǎng)⒆⑸鋭⒒騼龈煞邸?/p>

10.根據(jù)權(quán)利要求8或9所述的用途，其特征在于，所述皮膚美容產(chǎn)品的施用給皮膚帶來以下中的一種或多種改變：

使人皮膚成纖維細(xì)胞中I型原膠原蛋白的表達(dá)量提高至1.5-3倍；

使人毛囊真皮乳頭細(xì)胞的生長(zhǎng)速度提高至2-3倍；或

所述皮膚美容產(chǎn)品通過無針注射到皮膚后深入皮膚真皮層并均勻分布。