[發(fā)明專利]造血干細(xì)胞集落自動(dòng)計(jì)數(shù)裝置及集落計(jì)數(shù)方法

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• 申請日: 2019-10-18
• 公開（公告）號(hào): CN110684657A
• 公開（公告）日: 2020-01-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 趙新新;張怡;劉艷青
• 申請（專利權(quán)）人: 天晴干細(xì)胞股份有限公司
• 主分類號(hào): C12M3/00
• 分類號(hào): C12M3/00;C12M1/34;C12M1/00
• 代理公司: 23109 哈爾濱市松花江專利商標(biāo)事務(wù)所
• 代理人: 高倩

1.造血干細(xì)胞集落自動(dòng)計(jì)數(shù)裝置，包括殼體(1)和位于所述殼體(1)內(nèi)的控制單元(2)，其特征在于，還包括平移單元(3)和顯微鏡單元(4)；

所述殼體(1)密封、且殼體(1)上壁透明，所述殼體(1)上壁的上方用于放置多孔細(xì)胞培養(yǎng)板(5)；

所述平移單元(3)設(shè)置于殼體(1)內(nèi)，并且所述平移單元(3)能夠帶動(dòng)所述顯微鏡單元(4)在平行于殼體(1)上壁的平面上運(yùn)動(dòng)；

所述顯微鏡單元(4)的鏡頭朝向殼體(1)上壁，所述顯微鏡單元(4)能夠透過殼體(1)上壁觀察并拍攝所述多孔細(xì)胞培養(yǎng)板(5)中的樣本；

所述控制單元(2)分別用于控制平移單元(3)帶動(dòng)顯微鏡單元(4)移動(dòng)、用于以設(shè)定頻率控制顯微鏡單元(4)拍攝樣本圖像、以及用于分析所述圖像得到樣本中的干細(xì)胞集落類型和干細(xì)胞集落數(shù)量。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的造血干細(xì)胞集落自動(dòng)計(jì)數(shù)裝置，其特征在于，平移單元(3)為電動(dòng)十字滑臺(tái)模組；

所述電動(dòng)十字滑臺(tái)模組包括第一直線滑臺(tái)(3-1)和第二直線滑臺(tái)(3-2)，所述第二直線滑臺(tái)(3-2)固定在所述第一直線滑臺(tái)(3-1)的滑塊上，且所述第一直線滑臺(tái)(3-1)的滑塊運(yùn)動(dòng)方向垂直于所述第二直線滑臺(tái)(3-2)的滑塊運(yùn)動(dòng)方向；

所述第一直線滑臺(tái)(3-1)的兩端垂直固定在殼體(1)內(nèi)相對的一對內(nèi)側(cè)壁之間；

殼體(1)內(nèi)相對的另一對內(nèi)側(cè)壁上設(shè)有相對應(yīng)的滑臺(tái)槽(6)；

所述第二直線滑臺(tái)(3-2)的兩端嵌入所述滑臺(tái)槽(6)內(nèi)、能夠沿所述滑臺(tái)槽(6)移動(dòng)；

所述顯微鏡單元(4)固定在所述第二直線滑臺(tái)的滑塊上。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的造血干細(xì)胞集落自動(dòng)計(jì)數(shù)裝置，其特征在于，顯微鏡單元(4)包括數(shù)碼顯微鏡(4-1)和顯微鏡底座(4-2)；

所述顯微鏡底座(4-2)固定所述第二直線滑臺(tái)的滑塊上；

所述數(shù)碼顯微鏡(4-1)固定在所述顯微鏡底座(4-2)上，該數(shù)碼顯微鏡(4-1)將所觀察和拍攝的樣本圖像傳輸至控制單元(2)。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的造血干細(xì)胞集落自動(dòng)計(jì)數(shù)裝置，其特征在于，顯微鏡單元(4)還包括照明燈(4-3)；

所述照明燈(4-3)固定在顯微鏡底座(4-2)上，該照明燈(4-3)的發(fā)光方向朝向殼體(1)上壁。

5.根據(jù)權(quán)利要求1、2、3或4所述的造血干細(xì)胞集落自動(dòng)計(jì)數(shù)裝置，其特征在于，還包括培養(yǎng)盤固定裝置(7)；

所述培養(yǎng)盤固定裝置(7)固定在殼體(1)上表面四周，該培養(yǎng)盤固定裝置(7)包圍形成放置凹槽，所述多孔細(xì)胞培養(yǎng)板(5)放置于所述放置凹槽中。

6.基于造血干細(xì)胞集落自動(dòng)計(jì)數(shù)裝置的集落計(jì)數(shù)方法，其特征在于，步驟如下：

步驟一、按照多孔細(xì)胞培養(yǎng)板(5)的每個(gè)培養(yǎng)孔位置，通過平移單元(3)移動(dòng)顯微鏡單元(4)對任意一個(gè)培養(yǎng)孔內(nèi)的樣本進(jìn)行觀察；

步驟二、在培養(yǎng)周期內(nèi)，通過控制單元(2)控制顯微鏡單元(4)以一定時(shí)間間隔拍攝任意一個(gè)培養(yǎng)孔內(nèi)樣本培養(yǎng)狀況，得到連續(xù)的樣本培養(yǎng)參照圖片；

步驟三、通過連續(xù)的樣本培養(yǎng)參照圖片記錄樣本中干細(xì)胞集落連續(xù)生長狀態(tài)，并跟蹤干細(xì)胞集落分裂分化狀態(tài)及多簇的形成，進(jìn)而確定所述干細(xì)胞集落生長范圍和完整邊緣；

步驟四、根據(jù)干細(xì)胞集落生長范圍和完整邊緣區(qū)分各個(gè)干細(xì)胞集落，并識(shí)別干細(xì)胞集落數(shù)量。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的基于造血干細(xì)胞集落自動(dòng)計(jì)數(shù)裝置的集落計(jì)數(shù)方法，其特征在于，還包括，

當(dāng)在設(shè)定時(shí)間內(nèi)，通過連續(xù)的樣本培養(yǎng)參照圖片未識(shí)別到有干細(xì)胞集落生成、或識(shí)別到培養(yǎng)基因渾濁時(shí)，通過控制單元(2)發(fā)出警告信號(hào)。