[發明專利]一種降血壓小分子肽及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 201910988102.1
• 申請日: 2019-10-17
• 公開（公告）號: CN110628856A
• 公開（公告）日: 2019-12-31
• 發明（設計）人: 鄭忠亮
• 申請（專利權）人: 武漢普諾金生物科技股份有限公司
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K1/34;A23L33/18;A61K38/01;A61P9/12
• 代理公司: 44295 廣州海心聯合專利代理事務所(普通合伙)
• 代理人: 馬赟齋

本發明涉及一種降血壓小分子肽蛋白粉及其制備方法和應用。本發明采用雞蛋蛋白質為原料，首先利用乙醇分離出雞蛋中的油脂和卵磷脂，得到高純度的雞蛋蛋白質，再利用特定蛋白酶對純化后的雞蛋蛋白進行二次酶解，經二次超濾后得到分子量低于1000道爾頓的小分子肽。再利用小分子肽對人血管緊張素轉化酶進行活力抑制實驗，得到了具有一定抑制人血管緊張素轉化酶活性的小分子肽產品。

技術領域

本發明屬于生物工程技術領域，具體涉及一種降血壓小分子肽及其制備方法和應用。

背景技術

在腎素的水解作用下，血管緊張素原被激活，轉化為血管緊張素I。血管緊張素I在血管緊張素轉化酶的作用下又轉化為血管緊張素II。血管緊張素II是血管緊張系統中最強的血管收縮劑，具有刺激交感神經末梢釋放兒茶酚胺、收縮血管、刺激醛固酮分泌、促進心機及血管平滑肌細胞增殖和肥厚、促進水鹽代謝作用、增強心肌收縮力和神經系統作用，從而造成血壓飆高的作用。如果能夠抑制的活性,就可以實現降壓作用。而血管緊張素轉化酶抑制劑(Angiotensin I-converting enzyme inhibitor,簡稱ACEI)的作用就是抑制ACE的活性,減少血管緊張素的生成和舒緩激肽的破壞,從而抑制血壓升高達到降低血壓的目的。

由于藥物療法存在副作用,天然食物中的降血壓功能因子的攝入今后將成為重要組成部分。雖然食品降血壓肽比人工合成的功能弱,但它們的重要性在于這些活性相對較弱的降血壓物質潛在于我們日常攝入的食物中,并有其獨特的優點：一是只對高血壓患者可起到降壓作用,對血壓正常者無降壓作用,因而不會產生降血壓過度的問題；二是這些肽是經食品級蛋白酶在溫和條件下獲得的,其安全性極高,無副作用；三是活性的多樣性,除降血壓功能外,往往同時具免疫促進、抗凝血、易消化吸收、抗腫瘤等功能。四是具有較好的酸、熱穩定性、水溶性及勃度隨濃度變化遲鈍等特點,因而易于作為功能因子添加到各類食品中。

用食品為原料制備降血壓肽,己在食品中掀起風潮,其中日本是開發食品降血壓肽最早的國家,現己有產品上市。隨著人民生活水平的不斷提高,膳食結構有了明顯變化,利用功能食品來調節生理狀況的觀點,已越來越為消費者所接受。通過長期服用而達到預防、抑制、緩解和輔助治療高血壓的作用,保證人民健康,保證下一世紀我國經濟的可持續發展,在全國范圍內大力開展高血壓病的防治,積極治療高血壓病患者,同時控制整個人群的血壓水平,開發具有調節血壓作用的功能食品具有重要理論意義和應用價值。

降血壓肽最早1965年從美洲茅頭蝮蛇中發現之后,其研究工作不僅在蛇毒中展開,而且逐漸擴大至整個蛋白質領域,從提取存在于生物體中的各種天然降血壓肽研究開始,逐漸到通過各種其它方法如酶解、化學合成以及重組基因工程制備生產降血壓肽,該領域的研究工作發展雖然才不過四十多年的歷史,但其發展勢頭卻非常迅速。此后從其它食品蛋白質中分離的降血壓肽相繼出現,現己經證實上百種天然食物存在具有抑制活性的物質,其中包括豆類、茶類、魚貝殼類、水果、蕎麥粉、雞蛋等。食品中所含的降血壓肽的降血壓效果雖沒有合成降壓藥效果好,但因其無副作用,所以備受人們關注,如果從日常攝食的蛋白源中提取降血壓肽,通過長期服用可有效地預防高血壓發生。

由于降血壓肽屬于生物活性肽中的一類,因此其生產方法如前所述,但采用較多的仍為酶解法和微生物發酵法,其中以外源酶解蛋白質制備降血壓肽方法為主,從一些傳統食物中尋找降血壓肽功能因子的研究目前也有發展的趨勢。

食品蛋白質中生成制備降血壓肽的關鍵技術是酶的選擇,目前用于蛋白質水解的酶有動物蛋白酶、植物蛋白酶和微生物蛋白酶。不同的蛋白酶由于其本身作用位點的特異性，導致水解得到的肽產物有所區別,即獲取的降血壓肽的數量與活性有較大的不同。例如,1996年Ambar等用7種不同的蛋白酶對干酪乳清蛋白進行水解,結果發現不同的酶解產物對抑制活性有很大差異,其中嗜熱菌蛋白酶和蛋自酶K的酶解產物顯示較強的抑制活性,而胰蛋白酶和放線菌酶水解物的抑制活性較弱。吳建平等利用12種不同來源的蛋白酶水解大豆蛋白質得到的水解產物對ACE的抑制活性最大相差倍以上,辛志宏等采用種不同來源的蛋白酶水解麥胚蛋白質制備降血壓肽時產物對ACE的抑制活性最大相差4倍以上。