[發(fā)明專利]一種防治植物線蟲病害的巨大芽孢桿菌及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201910986516.0
• 申請日: 2019-10-17
• 公開（公告）號: CN110669691B
• 公開（公告）日: 2022-07-12
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 咸洪泉;張啟航;楊亞楠;趙洪海;李雅華;梁晨
• 申請（專利權(quán)）人: 青島農(nóng)業(yè)大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/22;A01P5/00;C12R1/11
• 代理公司: 北京匯捷知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11531
• 代理人: 馬金華

本發(fā)明公開了一種巨大芽孢桿菌及其在防治植物線蟲病害方面的應(yīng)用，其保藏編號是：CGMCC NO.18007，還公開了該菌株的培養(yǎng)方法、形成的菌劑、菌劑的制備方法及應(yīng)用。所述巨大芽孢桿菌菌落為奶白色、圓形或者近似圓形、邊緣透明鋸齒狀、質(zhì)地均勻、乳質(zhì)狀、濕潤扁平。巨大芽孢桿菌BCCX15為桿狀，呈鏈狀排布；產(chǎn)芽孢、芽孢中生，短柱狀，革蘭氏染色反應(yīng)陽性；所述巨大芽孢桿菌能利用蔗糖，不能利用乳糖。本發(fā)明提供的巨大芽孢桿菌為廣譜線蟲拮抗菌株，制備的菌劑高效防治植物線蟲病，還具有一定的促進作物生長和增產(chǎn)作用，在植物線蟲病害防治方面具有重要意義。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于微生物技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種巨大芽孢桿菌及其在防治植物線蟲病害方面的應(yīng)用。

背景技術(shù)

植物寄生線蟲或簡稱植物病原線蟲，分布廣、寄主多，侵染植物根系組織常常形成根結(jié)或胞囊，導(dǎo)致植物發(fā)生線蟲病害，其危害超過細菌和病毒,僅次于真菌病害。全球每年由植物寄生線蟲所造成的作物損失多達780億美元,線蟲病害防治已成為農(nóng)林生產(chǎn)上的重要問題。植物線蟲病害主要包括根結(jié)線蟲病和胞囊線蟲病，其中根結(jié)線蟲寄主相當廣泛，據(jù)不完全統(tǒng)計，根結(jié)線蟲寄主已超過3000種植物，例如茄科、葫蘆科、十字花科等植物；由于根結(jié)線蟲寄主范圍廣泛，生活史短，繁殖率高，所以其經(jīng)濟危害性很大，被認為是世界上最重要的植物病原物之一。根結(jié)線蟲對世界上重要的經(jīng)濟作物年造成的損失就高達數(shù)百億美元。在我國的大部分地區(qū)，根結(jié)線蟲病都有發(fā)生，一般導(dǎo)致作物減產(chǎn)25％左右，嚴重時可達70％以上。胞囊線蟲病害中的小麥胞囊線蟲在湖北、安徽、山西、山東、河北、河南等省的麥田均有發(fā)生，并且有繼續(xù)蔓延擴大的趨勢，受害的地區(qū)一般小麥減產(chǎn)20～30％，嚴重的達到70％，已嚴重威脅我國小麥的安全生產(chǎn)。

目前防治植物線蟲病害的方法基本分為農(nóng)業(yè)防治、物理防治、化學防治和生物防治四大類。輪作和選育種植抗線蟲品種是兩種有效的農(nóng)業(yè)防治線蟲病害方法，由于線蟲寄主范圍廣、耕地資源和耕作條件等方面制約，輪作受到較大限制；目前生產(chǎn)上尚缺乏農(nóng)藝性狀良好的抗線蟲病品種。熱力處理是有效的殺線蟲方法，但成本高、無差別殺死土壤中有益微生物，破壞土壤的微生態(tài)環(huán)境難以大面積推廣應(yīng)用。化學殺線劑高效、使用方便，是線蟲防治的主要方法，隨著長期使用化學殺線劑，化學殺線劑暴露出的毒性強、殘留高、嚴重污染環(huán)境等問題日趨突出，已不適用于綠色、有效的防治線蟲病害要求，一些生產(chǎn)上曾廣泛使用的殺線劑，如涕滅威、甲基異硫磷、滅線磷、克百威等相繼被禁用或限制使用，因此迫切的需要尋找一種新的綠色防治線蟲病害途徑來代替?zhèn)鹘y(tǒng)的防治方法。

生物防治具有綠色、安全、環(huán)境友好等特點，是控制根結(jié)線蟲和小麥孢囊線蟲的重要手段，也是今后的發(fā)展方向，開發(fā)生防制劑以作為化學農(nóng)藥的補充或替代品，利用拮抗微生物來防治線蟲病害的研究倍受關(guān)注,具有十分巨大的社會、經(jīng)濟效益與環(huán)境效益。線蟲病害生物防治研究已經(jīng)取得了一定進展，其中研究較多的有真菌和細菌兩大類。大部分生防真菌在室內(nèi)及盆栽試驗中有較好的防治效果，但在大田防治試驗中往往會受定殖能力、溫度、濕度等多種因素的限制而無法發(fā)揮出理想的效果。細菌一般具有易培養(yǎng)、繁殖快、定殖能力強等特點，是重要的線蟲生防菌資源，但是不同細菌菌株生防效果差異極大，具有菌株特異性，篩選高效、廣譜線蟲拮抗細菌菌株，開發(fā)其培養(yǎng)和應(yīng)用技術(shù)是線蟲病害生物防治研究應(yīng)用需要解決的重要問題。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種巨大芽孢桿菌及其在防治植物線蟲病害方面的應(yīng)用，本發(fā)明的有益效果是提供的巨大芽胞桿菌為廣譜線蟲拮抗菌株，制備的菌劑高效防治植物線蟲病，還具有一定的促進作物生長和增產(chǎn)作用。

本發(fā)明從小麥胞囊線蟲病田土壤中篩選獲得的一株細菌為巨大芽孢桿菌(Bacillus megatherium)BCCX15，保藏編號是：CGMCC NO.18007，保藏單位：中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，地址：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號，請求保藏單位為青島農(nóng)業(yè)大學；保藏日期：2019年6月20日。

本發(fā)明通過研究發(fā)現(xiàn)，優(yōu)選的菌體培養(yǎng)條件為，采用加富牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基，BCCX15的最優(yōu)發(fā)酵條件為pH7.5、接種量3％、10％的裝瓶量、24h的培養(yǎng)時間。