[發明專利]一種腈苯唑單克隆抗體的制備及其應用

在審

• 申請號: 201910976828.3
• 申請日: 2019-10-15
• 公開（公告）號: CN110684112A
• 公開（公告）日: 2020-01-14
• 發明（設計）人: 何方洋;萬宇平;馮才偉;趙正苗;崔海峰;王兆芹;馬玉華
• 申請（專利權）人: 北京勤邦生物技術有限公司
• 主分類號: C07K16/44
• 分類號: C07K16/44;C07D233/56;G01N33/577;G01N33/558;G01N33/52
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1.一種腈苯唑單克隆抗體，其特征在于所述單克隆抗體由腈苯唑半抗原-載體蛋白偶聯物作為免疫原制備獲得，所述半抗原的制備方法為：

取化合物a 1.89g，加干燥的無水N，N-二甲基甲酰胺50ml溶解，加入氫化鈉0.97g，充分攪拌，加化合物b 1.81g，室溫攪拌4h，加化合物c 1.23g，油浴加熱，100℃反應12h；停止反應；冷卻到室溫，加水100ml，加乙酸乙酯120ml震蕩，靜置，分去水相，有機相無水硫酸鈉干燥蒸干，上硅膠柱，石油醚/乙酸乙酯(v/v，5/1)洗脫分離，得到中間產物化合物d 1.17g收率28.74％；

取化合物d 1.17g，加2mol/L氫氧化鈉40ml溶解，60℃加熱攪拌，直至完全溶解，繼續反應2h，停止反應，冷卻到室溫，加6mol/L鹽酸調節pH值到6，加二氯甲烷90ml萃取，水洗，干燥蒸干，乙酸乙酯/正己烷(v/v，1/6)75ml重結晶，得到腈苯唑半抗原e 0.75g，收率66.37％。

2.如權利要求1所述的腈苯唑單克隆抗體，其特征在于所述腈苯唑半抗原的分子結構式為：

3.如權利要求1所述的腈苯唑單克隆抗體，其特征在于所述單克隆抗體用于制備檢測腈苯唑的試紙條，所述試紙條包括：樣品吸收墊(1)、結合物釋放墊(2)、反應膜(3)、吸水墊(4)和底板(7)，其特征在于所述反應膜上具有包被有腈苯唑半抗原-載體蛋白偶聯物的檢測線(5)和包被有羊抗鼠抗抗體的質控線(6)，所述結合物釋放墊(2)噴涂有腈苯唑單克隆抗體-膠體金標記物。

4.如權利要求1所述的腈苯唑單克隆抗體，其特征在于所述單克隆抗體用于制備檢測腈苯唑的酶聯免疫試劑盒，所述試劑盒包括：包被有包被原的酶標板、腈苯唑標準品溶液、腈苯唑抗體、酶結合物濃縮液、酶結合物稀釋液、底物顯色液、終止液、洗滌液，所述包被原為腈苯唑偶聯抗原，所述酶結合物為酶標記的腈苯唑抗體。