[發明專利]PAI-CPT還原響應型雙藥遞送納米粒子的制備方法

有效

• 申請號: 201910976386.2
• 申請日: 2019-10-15
• 公開（公告）號: CN110664758B
• 公開（公告）日: 2021-11-30
• 發明（設計）人: 萬霞;蔡英華
• 申請（專利權）人: 無錫市人民醫院
• 主分類號: A61K9/14
• 分類號: A61K9/14;A61K47/34;A61K31/704;A61K31/4745;A61P35/00
• 代理公司: 南京禹為知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 32272
• 代理人: 王江南

1.PAI-CPT還原響應型雙藥遞送納米粒子的制備方法，其特征在于：包括，

合成DSSP-OH；

合成CPT-DSSP；

CPT-DSSP模型反應；

合成PAI-CPT前藥；

PAI-CPT前藥的自組裝；

制備雙藥遞送納米粒子；

所述合成PAI-CPT前藥，其為將0.1mmol硫內酯馬來酰亞胺和PEG₅₀₀溶于1mL DMSO中，用氬吹掃10min，然后加入0.1mmol 4,7,10-三氧-1,13-十三烷二胺，在室溫下引發聚合反應24小時，之后加入CPT-DSSP并反應1小時，在體積比乙醚：丙酮＝2：1的混合溶劑中沉淀純化，真空干燥4小時；

所述PEG₅₀₀和CPT-DSSP的總摩爾量為0.1mmol，PEG₅₀₀和CPT-DSSP的摩爾比為(60～90)：(10～40)；所述聚合反應過程中，巰基濃度控制在0.25mM以下。

2.如權利要求1所述的PAI-CPT還原響應型雙藥遞送納米粒子的制備方法，其特征在于：所述合成DSSP-OH，為將2,2'-二吡啶二硫醚溶于甲醇中，加入冰醋酸作為催化劑，緩慢加入巰基乙醇的甲醇稀釋液，并在黑暗下攪拌2～4小時，真空干燥至黃色油狀物。

3.如權利要求2所述的PAI-CPT還原響應型雙藥遞送納米粒子的制備方法，其特征在于：所述2,2'-二吡啶二硫醚的加入量為每30mL甲醇加入25.5mmol的2,2'-二吡啶二硫醚，所述冰醋酸加入量為0.5mL，所述巰基乙醇加入量為17.1mmol；所述緩慢加入巰基乙醇的甲醇稀釋液，其中，所述巰基乙醇加入量為17.1mmol，并稀釋于10ml甲醇中，所述緩慢加入，時間為20分鐘內；真空干燥至黃色油狀物后，使用體積比乙酸乙酯：己烷＝3：7的洗脫液，通過硅膠色譜法純化粗產物。

4.如權利要求1～3中任一項所述的PAI-CPT還原響應型雙藥遞送納米粒子的制備方法，其特征在于：所述合成CPT-DSSP，為將CPT、4-二甲基氨基吡啶、三光氣懸浮在無水二氯甲烷中，在氬氣下攪拌得到混合物，將所述DSSP-OH溶解 在無水四氫呋喃中并滴加到所述混合物中，室溫下攪拌過夜，反應后干燥溶劑，純化，得到白色粉末CPT-DSSP。

5.如權利要求4所述的PAI-CPT還原響應型雙藥遞送納米粒子的制備方法，其特征在于：所述將CPT、4-二甲基氨基吡啶、三光氣懸浮在無水二氯甲烷中，其為，每50mL無水二氯甲烷中，CPT的加入量為5.74mmol、4-二甲基氨基吡啶的加入量為17.2mmol、三光氣的加入量為1.92mmol，所述DSSP-OH的加入量為6.31mmol。

6.如權利要求1～3、5中任一項所述的PAI-CPT還原響應型雙藥遞送納米粒子的制備方法，其特征在于：所述CPT-DSSP模型反應，為將0.01mmol的CPT-DSSP溶解在10mL DMSO中并用氬氣吹掃，加入等量的巰基乙醇，在室溫下在黑暗下攪拌。

7.如權利要求1～3、5中任一項所述的PAI-CPT還原響應型雙藥遞送納米粒子的制備方法，其特征在于：所述PAI-CPT前藥的自組裝，為將每3mg所述PAI-CPT前藥溶于0.3mL DMSO中，劇烈攪拌下加入到3mL水中，在水中透析8小時，4000rpm離心5分鐘。

8.如權利要求1～3、5中任一項所述的PAI-CPT還原響應型雙藥遞送納米粒子的制備方法，其特征在于：所述制備雙藥遞送納米粒子，其為，將5mg DOX鹽酸鹽溶解于0.2mL DMSO中，加入2mL三乙胺，得到DOX儲備溶液，將5mg所述PAI-CPT前藥和0.3mL所述DOX儲備溶液溶解在5mL二氯甲烷中，在劇烈攪拌下加入10mL去離子水，功率500W脈沖超聲波處理10分鐘，攪拌過夜以干燥二氯甲烷，透析除去DMSO和游離DOX。