[發(fā)明專利]一種硒香菇多糖的提取分離純化方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201910973929.5
• 申請日: 2019-10-14
• 公開（公告）號: CN110511297A
• 公開（公告）日: 2019-11-29
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 趙成誠;黃祥宏;李娜
• 申請（專利權(quán)）人: 武漢華聯(lián)科生物技術(shù)有限公司
• 主分類號: C08B37/02
• 分類號: C08B37/02
• 代理公司: 11427 北京科家知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙)
• 代理人: 宮建華<國際申請>=<國際公布>=<進入

本發(fā)明公開了一種硒香菇多糖的提取分離純化方法，利用稀堿提取香菇多糖，然后利用亞硒酸鈉和香菇多糖在反應(yīng)液中反應(yīng)獲得硒香菇多糖。其步驟是：S1、首先對香菇預(yù)處理；S2、堿溶性香菇多糖提取；S3、香菇多糖的制備；S4、采用乙醇沉淀法、Sevag法、鹽酸法、三氯乙酸法將香菇多糖的分離純化；S5、利用亞硒酸鈉和香菇多糖在反應(yīng)液中反應(yīng)獲得硒香菇多糖。本發(fā)明的硒香菇多糖的提取分離純化方法，利用亞硒酸鈉和香菇多糖在反應(yīng)液中反應(yīng)獲得硒香菇多糖，通過優(yōu)化香菇多糖的提取工藝，提高硒香菇多糖的獲得率。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及細胞生物學(xué)與分析化學(xué)相結(jié)合技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種硒香菇多糖的提取分離純化方法。

背景技術(shù)

香菇多糖(Lentinan LNT)是從擔子菌門側(cè)耳科傘菌屬真菌香菇子實體(Lentinusedodes)中分離提取分離的葡聚糖。研究報道證實，香菇多糖作為免疫增強劑，有多重生物活性，包括免疫調(diào)節(jié)、抗氧化、抗菌、抗病毒、抗炎癥和抗癌等作用。但傳統(tǒng)的提取方法提取效率低，純度不高的缺點。

硒(selenium)是人體必需的微量元素，在人體不同的生理功能中發(fā)揮重要作用，對于機體的健康維護，疾病的防治具有顯著作用。硒主要以有機硒(如硒代蛋氨酸，硒代半胱氨酸，γ-谷氨酰基Se-甲基硒代半胱氨酸)和無機硒(如硒酸鈉和亞硒酸鈉)的形式存在。許多流行病學(xué)和臨床研究表明，生理水平的硒可能具有廣泛的生物學(xué)效應(yīng)，包括對心臟病、衰老、氧化應(yīng)激損傷甚至腫瘤具有防治作用。

硒香菇多糖是將香菇多糖及亞硒酸鈉通過化學(xué)反應(yīng)得到的有機化合物。具有抗腫瘤、抗氧化等多種功效。目前合成硒香菇多糖的方法不夠成熟，本發(fā)明利用亞硒酸鈉和香菇多糖在反應(yīng)液中反應(yīng)獲得硒香菇多糖。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)中存在的上述問題，提供一種硒香菇多糖的提取分離純化方法，通過優(yōu)化香菇多糖的提取工藝，提高硒香菇多糖的獲得率。

為實現(xiàn)上述目的，達到上述技術(shù)效果，本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案來實現(xiàn)：

一種硒香菇多糖的提取分離純化方法，包括如下步驟：

S1、香菇預(yù)處理

將香菇塊烘干，粉碎機粉碎過40目篩，得香菇粉末。向香菇粉末中加入石油醚于60℃水浴中加熱回流脫脂1h，離心收集殘渣，重復(fù)脫脂三次，溶劑揮干后，加入80％乙醇磁力攪拌，以除去小分子醇溶物，離心收集殘渣，依此過程重復(fù)三次，50℃干燥，得脫脂香菇粉末；

S2、堿溶性香菇多糖提取

取脫脂香菇粉末10g置于燒杯中，加入蒸餾水1000rpm磁力攪拌5min使其充分混勻，以1：50固液比例于80℃水浴中熱水浸提25min，離心分離上清液，去除水溶性物質(zhì)，收集殘渣，以1：100固液比例加入0.5M氫氧化鈉溶液，4℃冰浴中超聲提取40min，離心得上清液Ⅰ；所得殘渣依照上述方法重復(fù)提取一次得上清液Ⅱ，合并兩次上清液，并用10％的醋酸溶液中和至pH＝6，用蒸餾水洗滌膠狀沉淀反復(fù)脫鹽后冷凍干燥得堿溶性香菇多糖粗品；

S3、香菇多糖的制備

稱取3.00g堿溶性香菇多糖粗品置三口燒瓶中，加入50mL異丙醇和20mL20％NaOH的混合溶液，冰浴攪拌3h使其分散均勻；

室溫下，取12g一氯乙酸溶于50mL異丙醇中，再與20mL20％NaOH溶液相混合；通過常壓滴液漏斗將混合液緩慢滴加入反應(yīng)體系中，攪拌反應(yīng)3h，將反應(yīng)液升溫至60℃繼續(xù)攪拌30min；