[發明專利]一種鐮刀菌孢子的保存方法有效
| 申請號： | 201910973311.9 | 申請日： | 2019-10-14 |
| 公開（公告）號： | CN110607237B | 公開（公告）日： | 2021-08-24 |
| 發明（設計）人： | 劉易科;高春保;朱展望;鄒娟;舒軍;朱光;佟漢文;陳泠;張宇慶 | 申請（專利權）人： | 湖北省農業科學院糧食作物研究所 |
| 主分類號： | C12N1/04 | 分類號： | C12N1/04;C12R1/77 |
| 代理公司： | 常州佰業騰飛專利代理事務所(普通合伙) 32231 | 代理人： | 楊靜文 |
| 地址： | 430064 湖*** | 國省代碼： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 鐮刀 孢子 保存 方法 | ||
1.一種禾谷鐮刀菌孢子的保存方法，其特征在于，包括如下步驟：
S1：以禾谷鐮刀菌菌株為原材料，以綠豆湯為培養基，進行禾谷鐮刀菌孢子的培養，得到禾谷鐮刀菌菌液；
S2：對所述禾谷鐮刀菌菌液進行過濾，對濾液進行離心后，去除上清液，得到所述禾谷鐮刀菌孢子；
S3：將所述禾谷鐮刀菌孢子的濃度調至工作濃度，得到工作菌液；
S4：取工作體積的所述工作菌液裝至第二離心管內，離心，去除上清液，得到孢子沉淀物；
S5：將所述第二離心管風干，得到干燥的所述孢子沉淀物；
S6：將所述第二離心管密封，于-20℃條件下保存；
步驟S3中所述的工作濃度為5×105個/ml；
步驟S4中所述的工作體積為1ml。
2.如權利要求1所述的禾谷鐮刀菌孢子的保存方法，其特征在于，步驟S1包括：
S1-1：取-20℃保存的禾谷鐮刀菌菌株，接種于PDA平板，于28℃黑暗條件下培養3d，進行禾谷鐮刀菌的活化；
S1-2：取所述禾谷鐮刀菌中活化的菌絲，接種于綠豆湯液體培養基，于光照條件下，28℃震蕩培養5～7d，進行所述禾谷鐮刀菌孢子的培養，得到所述禾谷鐮刀菌菌液。
3.如權利要求1或2所述的禾谷鐮刀菌孢子的保存方法，其特征在于，所述綠豆湯的濃度為6％。
4.如權利要求1所述的禾谷鐮刀菌孢子的保存方法，其特征在于，步驟S2中所述離心的轉速為5000rpm，所述離心的時間為10min。
5.如權利要求1所述的禾谷鐮刀菌孢子的保存方法，其特征在于，所述過濾次數為2次。
6.如權利要求1所述的禾谷鐮刀菌孢子的保存方法，其特征在于，步驟S4中所述離心的轉速為10000rpm，所述離心的時間為1min。
7.如權利要求1所述的禾谷鐮刀菌孢子的保存方法，其特征在于，步驟S5中所述風干的時間為2～3小時。
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