[發明專利]一種可反復消除的乙醇酸傳感器及其構建方法

有效

• 申請號: 201910972552.1
• 申請日: 2019-10-14
• 公開（公告）號: CN110684792B
• 公開（公告）日: 2022-01-11
• 發明（設計）人: 鄧禹;徐淑敏;周勝虎;毛銀;李國輝;趙運英
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: C12N15/70
• 分類號: C12N15/70;C12N1/21;C12Q1/6897;C12Q1/02;C12R1/19
• 代理公司: 哈爾濱市陽光惠遠知識產權代理有限公司 23211
• 代理人: 仇鈺瑩

1.一種生物傳感器，其特征在于，包括啟動子P_glcD、glcC基因、第一標記物基因、第二標記物基因和溫敏型復制子Ori101；所述傳感器中的基因沿基因表達的方向依次為第一標記物基因、glcC基因和第二標記物基因；所述第一標記物基因為遠紅色熒光蛋白基因FRFP基因；所述第二標記物基因為綠色熒光蛋白sfGFP基因；所述P_glcD調控第二標記物基因的表達；所述P_glcD上整合glcC-glycolate變構蛋白的結合位點；所述glcC-glycolate變構蛋白的結合位點為順式反應元件上游增強因子UAS；組成型啟動子P_consensitive調控第一標記物基因的表達；以啟動子P_ffS調控glcC基因的表達；

所述啟動子P_glcD的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述啟動子P_ffS的核苷酸序列如SEQID NO.2所示；所述glcC基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；所述UAS的序列如SEQ IDNO.4所示；所述溫敏型復制子Ori101的序列如SEQ ID NO.6所示；FRFP及其啟動子序列如SEQ ID NO.5所示。

2.攜帶權利要求1所述生物傳感器的質粒或細胞。

3.根據權利要求2所述的質粒或細胞，其特征在于，所述細胞為大腸桿菌細胞。

4.一種基因工程菌，其特征在于，以大腸桿菌為宿主，攜帶權利要求1所述的生物傳感器或權利要2所述的質粒。

5.根據權利要求4所述的基因工程菌，其特征在于，所述大腸桿菌包括E. coliBL21、E. coliBL21（DE3）、E. coliJM109、E. coliDH5α、E. coliTOP10中的任一種。

6.根據權利要求4所述的基因工程菌，其特征在于，所述大腸桿菌敲除基因組中glcC基因。

7.權利要求1所述的生物傳感器在篩選代謝乙醇酸的菌株中的應用。