[發明專利]一種深色有隔內生菌根真菌菌劑組合體制備方法

有效

• 申請號: 201910963913.6
• 申請日: 2019-10-11
• 公開（公告）號: CN110577902B
• 公開（公告）日: 2021-07-09
• 發明（設計）人: 吳艷清;白菁華;劉文靜;趙茹茹;張士薇;其他發明人請求不公開姓名
• 申請（專利權）人: 保定學院;保定市稀成生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12R1/645
• 代理公司: 石家莊中和昇知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 13145
• 代理人: 付會平

1.一種深色有隔內生菌根真菌菌劑組合體制備方法，其特征在于，具體制備方法如下：

S1：選取野生一年生須根草本植物，將其根系洗凈，剪成長1cm左右的根段；然后將鏡檢含有深色有隔內生菌根真菌菌絲的新鮮根段的兩端切掉，并將根段切成0.3～0.5cm的根小段，再進行消毒；其中，一年生須根草本植物為櫛齒黃鵪菜、泥胡菜和朝天委陵菜中的任一種；

S2：制備馬鈴薯葡萄糖瓊脂固體培養體系、馬鈴薯葡萄糖液體培養體系和馬鈴薯葡萄糖瓊脂雙抗固體培養體系；所述馬鈴薯葡萄糖瓊脂雙抗固體培養體系中添加的抗性因子為氨芐青霉素和硫酸鏈霉素；

S3：將S1處理的根小段接種到馬鈴薯葡萄糖瓊脂雙抗固體培養體系上進行菌種分離培養；

S4：待根小段長出深色菌絲后，挑取成熟的深色菌絲接種在S2中制得的馬鈴薯葡萄糖瓊脂固體培養體系表面進行純化培養，并進行2次繼代培養；

S5：制備菌種種子液；

S6：將種子液接種到馬鈴薯葡萄糖液體培養體系中進行發酵培養，獲取發酵液和菌絲球；

S7：將發酵液和菌絲球制成10-12份干粉菌劑，并按照比例在干粉菌劑中加入保水劑70-75份、營養劑15-20份和緩釋劑0.5-1.0份，充分混合均勻即得到深色有隔內生菌根真菌菌劑組合體；

其中，保水劑為滅菌后的硅藻土和孔隙巖顆粒，營養劑為滅菌后的組合腐殖土，緩釋劑為聚丙烯酸酯。

2.根據權利要求1所述的一種深色有隔內生菌根真菌菌劑組合體制備方法，其特征在于：所述抗性因子的用量為每1000mL蒸餾水中加入50mg/L的氨芐青霉素和硫酸鏈霉素各100μL。

3.根據權利要求1所述的一種深色有隔內生菌根真菌菌劑組合體制備方法，其特征在于：所述S2中的馬鈴薯葡萄糖瓊脂雙抗固體培養體系上接種3-5個根小段。

4.根據權利要求1所述的一種深色有隔內生菌根真菌菌劑組合體制備方法，其特征在于：所述S6中的種子液的接種量為10%。