[發(fā)明專(zhuān)利]一種聯(lián)合定量檢測(cè)CRP與SAA的時(shí)間分辨熒光免疫層析試劑盒及制備方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910954368.4
• 申請(qǐng)日: 2019-10-09
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN110609025A
• 公開(kāi)（公告）日: 2019-12-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 朱傳增;李金偉;石曉強(qiáng);吉海
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 上海奧普生物醫(yī)藥有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): G01N21/64
• 分類(lèi)號(hào): G01N21/64;G01N33/68;G01N33/558
• 代理公司: 31211 上海浦一知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司
• 代理人: 鄭權(quán)

本專(zhuān)利公開(kāi)了一種聯(lián)合定量檢測(cè)CRP及SAA的時(shí)間分辨熒光免疫層析試劑盒及其制備方法；所述試劑盒包括熒光免疫層析試劑板、樣本稀釋液及血液采樣裝置；所述熒光免疫層析試劑板包含有樣品墊，CRP、SAA、羊抗兔包被的熒光微球制備的熒光墊，抗CRP包被線(xiàn)、抗SAA包被線(xiàn)和兔抗質(zhì)控包被線(xiàn)的硝酸纖維素膜；所述樣本稀釋液含表面活性劑。本發(fā)明的試劑盒，一次取樣僅需3微升，三分鐘內(nèi)同時(shí)獲取兩個(gè)結(jié)果，能夠檢測(cè)指尖血與靜脈血，精密度在10％以?xún)?nèi)，兩個(gè)項(xiàng)目的最低檢出限均小于0.1mg/L，線(xiàn)性范圍可到300mg/L，與西門(mén)子的臨床樣本相關(guān)性r均在0.975以上。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于免疫診斷技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種同時(shí)定量檢測(cè)CRP及SAA的時(shí)間分辨熒光免疫層析試劑盒的制備方法。

背景技術(shù)

C反應(yīng)蛋白：(Creactive protein，CRP)CRP是急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，在感染發(fā)生后6-8小時(shí)開(kāi)始升高，24-48小時(shí)達(dá)到頂峰。升高幅度與細(xì)菌感染的程度呈正相關(guān)。是鑒別細(xì)菌感染與病毒感染的指標(biāo)，病毒感染時(shí)CRP一般不增高，但在自身免疫性疾病時(shí)也增高。臨床應(yīng)用相當(dāng)廣泛，包括急性感染性疾病的診斷和鑒別診斷，手術(shù)后感染的監(jiān)測(cè)；抗生素療效的觀(guān)察；病程檢測(cè)及預(yù)后判斷等。

SAA全名血清淀粉樣蛋白A，是一種由肝細(xì)胞產(chǎn)生后被分泌到血清中的一種急性時(shí)相蛋白，當(dāng)機(jī)體發(fā)生感染或損傷時(shí),可在4-6h內(nèi)迅速升高約1000倍，當(dāng)機(jī)體抗原清除后則迅速降低至正常水平。SAA是急性相蛋白，機(jī)體受感染后，4-6h內(nèi)即可迅速升高約1000倍，清除病原體后又可迅速的降低至正常水平，是反映機(jī)體感染情況和炎癥恢復(fù)的靈敏指標(biāo)；SAA與目前臨床最廣泛使用的CRP相比較，有一個(gè)最重要的不同之處：SAA升高見(jiàn)于病毒、支原體、細(xì)菌感染，且敏感性高于CRP；CRP升高見(jiàn)于細(xì)菌感染，病毒及支原體等病原體感染不升高或僅輕微升高。

CRP、SAA聯(lián)合檢測(cè)可對(duì)早期細(xì)菌和病毒感染的鑒別診斷提供有力的數(shù)據(jù)，例如兩者均增高細(xì)菌感染的趨向性較大；而CRP正常SAA明顯增高者,結(jié)合臨床對(duì)病毒性感染的趨向性診斷又多了一份依據(jù)。例如因物理因素所致的發(fā)熱和病毒感染引起的感冒，兩個(gè)病例同測(cè)WBC、 CRP，都可能是正常結(jié)果，因而不能鑒別診斷，但加測(cè)SAA指標(biāo)后，SAA增高者結(jié)合臨床癥狀提示病毒性感染可能性的證據(jù)更充分；特別在嬰幼兒感染性疾病的早期，細(xì)菌和病毒感染確是很難鑒別，而SAA和CRP的聯(lián)合檢測(cè)比單獨(dú)測(cè)CRP更有獨(dú)特的意義，更有利于小兒感染性疾病的早期診斷,對(duì)細(xì)菌和病毒感染的初篩和鑒別診斷又多了一份依據(jù)，更能體現(xiàn)單項(xiàng)指標(biāo)不能反映的增值意義，減少不必要的抗生素的應(yīng)用,有利于病人的早日康復(fù)和預(yù)防耐藥細(xì)菌形成。SAA聯(lián)合CRP檢測(cè)既可作為病毒感染的輔助診斷又可動(dòng)態(tài)觀(guān)察病情和療效并能有效指導(dǎo)臨床用藥。因此被人們譽(yù)為病毒感染輔助診斷的王牌試驗(yàn)。

現(xiàn)有技術(shù)中也有報(bào)道定量聯(lián)合檢測(cè)CRP/SAA的免疫熒光層析試紙及試劑盒的方案，但上述方案存在著檢測(cè)耗時(shí)長(zhǎng)、檢測(cè)需要血液樣本量多、檢測(cè)精密度較差等缺點(diǎn)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題在于，提供一種聯(lián)合定量檢測(cè)C-反應(yīng)蛋白(CRP)與血清淀粉樣蛋白A(SAA)的時(shí)間分辨熒光免疫層析試劑盒及其制備方法和使用方法，與現(xiàn)有的聯(lián)合檢測(cè)CRP/SAA的免疫熒光層析試紙及試劑盒的方案相比較，具有檢測(cè)耗時(shí)短、檢測(cè)需要血液樣本量少、檢測(cè)精密度高的優(yōu)點(diǎn)。

為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為：

一種聯(lián)合定量檢測(cè)CRP及SAA的時(shí)間分辨熒光免疫層析試劑盒，包括：熒光免疫層析試劑板、樣本稀釋液和血液采樣裝置；

所述熒光免疫層析試劑板包含樣品墊、熒光墊、硝酸纖維素膜和吸水墊；所述熒光墊包被有綴合配對(duì)抗SAA單抗1的熒光微球、綴合配對(duì)抗CRP單抗1的熒光微球、和綴合羊抗兔抗體的熒光微球；所述硝酸纖維素膜上設(shè)有一條包被有抗CRP單抗2的CRP檢測(cè)線(xiàn)、一條包被有抗SAA單抗2的SAA檢測(cè)線(xiàn)和一條包被有兔抗體的質(zhì)控線(xiàn)；