[發明專利]一組用單管檢測人運動神經元基因的引物及試劑盒

有效

• 申請號: 201910944785.0
• 申請日: 2019-09-30
• 公開（公告）號: CN110669833B
• 公開（公告）日: 2022-11-15
• 發明（設計）人: 吳英松;周其偉;康小龍;李明;楊學習
• 申請（專利權）人: 廣州市達瑞生物技術股份有限公司
• 主分類號: C12Q1/686
• 分類號: C12Q1/686;C12N15/11
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 段卉

1.一組用單管檢測人運動神經元基因的引物，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ IDNO.1～8所示。

2.權利要求1所述的引物在制備檢測人運動神經元基因的試劑盒中的應用。

3.一個單管檢測人運動神經元基因的試劑盒，其特征在于，包括權利要求1所述的引物。

4.根據權利要求3所述的試劑盒，其特征在于，還含有PCR 反應混合液、引物混合液、PCR酶混合液、SMN校準品、SMN質控品、ROX Size以及稀釋液。

5.根據權利要求4所述的試劑盒，其特征在于，權利要求1所述的引物以引物混合液的形式存在，引物混合液中各引物按照10×工作濃度進行儲存，SEQ ID NO.1～2所示引物的工作濃度為0.2～0.3μmol/L，SEQ ID NO. 3～4所示引物的工作濃度為0.02～0.1μmol/L，SEQ ID NO.5～8所示引物的工作濃度為0.05～0.1μmol/L。

6.根據權利要求4所述的試劑盒，其特征在于，PCR反應混合液按照5×工作濃度進行儲存，包括Tris-Hcl緩沖液、氯化鉀、硫酸銨、小牛血清蛋白、明膠、吐溫-20以及二硫蘇糖醇、dATP、dGTP、dCTP、dTTP、dUTP，其工作濃度依次為10～50mmol/L、20～45mmol/L、16.6 mmol/L、100μg/mL、0.01%、0.05%～01%、5 mmol/L、200nM、200nM、200nM、100nM、200nM。

7.根據權利要求4所述的試劑盒，其特征在于，PCR酶混合液包括TaqHs聚合酶和UDG酶，其工作酶活性比例配比為TaqHs聚合酶:UDG酶的范圍=10：1～5：1。

8.根據權利要求4所述的試劑盒，其特征在于，其SMN校準品為SMN1和SMN2的第7號外顯子以及內參基因的拷貝數均為2的正常人樣本基因組DNA，其工作濃度為10ng/μL，上樣量范圍為20ng～50ng，用于均一化待檢樣本的檢測峰。

9.根據權利要求4所述的試劑盒，其特征在于，SMN質控品為SMN1基因的第7號外顯子拷貝數≤1，且SMN2基因的第7號外顯子拷貝數≥1的人基因組DNA。