[發明專利]一種瑞他莫林起始物料和中間體的HPLC-ELSD檢測方法

有效

• 申請號: 201910942117.4
• 申請日: 2019-09-30
• 公開（公告）號: CN110646540B
• 公開（公告）日: 2021-12-24
• 發明（設計）人: 譚慧玲;魏文國;張曉斌
• 申請（專利權）人: 武漢嘉諾康醫藥技術有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;B01D15/10
• 代理公司: 武漢宇晨專利事務所(普通合伙) 42001
• 代理人: 余曉雪

本發明涉及藥物化合物起始物料和中間體的檢測技術領域，具體公開了一種瑞他莫林起始物料和中間體的HPLC?ELSD檢測方法。利用金剛烷基作為填料的色譜柱，采用HPLC?ELSD聯用技術使得TRP和TRP?XA得到有效分離。本發明提供的測量方法簡便、可靠、迅速，適合用于分析檢測瑞他莫林起始物料TRP和中間體TRP?XA。

技術領域

本發明涉及藥物化合物起始物料和中間體的檢測技術領域，尤其涉及一種瑞他莫林起始物料和中間體的HPLC-ELSD檢測方法。

背景技術

瑞他莫林是一種新的截短側耳素類的抗菌藥物，截短側耳素是由一種可食用的蘑菇擔子菌類所產生。瑞他莫林是截短側耳素類似物的半合成物，在體外試驗中發現其對革蘭陽性細菌及一些革蘭陰性菌具有很高的抗菌活性，其作用機制與目前可得到的抗菌藥物不相同，是第一個獲準用于人類的截短側耳素類抗菌藥物，可應用于治療膿皰瘡和小面積撕裂傷、擦傷或縫合傷口出現的感染。

因為瑞他莫林確切的療效，該藥在大中型醫院已得到廣泛的應用。因此，瑞他莫林的合成、生產、國產化，將帶來巨大的商機。

在瑞他莫林的合成生產過程中，TRP是瑞他莫林合成中的一個重要的起始物料，TRP-XA是瑞他莫林合成中的重要中間體，因此，瑞他莫林合成中對TRP和TRP-XA的檢測十分有必要。但是TRP和TRP-XA沒有紫外吸收，使用高效液相色譜儀紫外檢測器不能進行分析。起始物料TRP、中間體TRP-XA的合成路線和結構式如下：

TRP和中間體TRP-XA的化學名稱分別為：托品醇和O-乙基S-((1R，3S，5S)-8-甲基-8-氮雜雙環[3.2.1]辛基-3-基)羰基二硫代酯。

經檢索，申請人查閱到申請號為201110382231.X，專利名稱為鹽酸托烷司瓊注射液中α-托品醇的檢測方法的專利。該發明涉及α-托品醇的檢測方法，尤其涉及一種鹽酸托烷司瓊注射液中α-托品醇的檢測方法。包括如下步驟：分別配制供試品溶液與對照品溶液后，再分別點于同一高效硅膠GF254薄層板上經展開、取出晾干、采用碘鉍酸鉀溶液染色，最后檢視結果。供試品溶液如顯示與對照溶液中α-托品醇相同位置的斑點，可確定供試品溶液中含α-托品醇；α-托品醇的含量是通過對供試品溶液所顯斑點顏色與對照品溶液所顯斑點顏色進行強弱比較來確定的。該發明具有分辨率高、靈敏度高、方法簡單、速度快等特點，利用該發明可以檢測到鹽酸托烷司瓊注射液中0.30μg含量以下的α-托品醇，為鹽酸托烷司瓊注射液制備過程中的質量控制提供了保障。

文獻報道采用薄層色譜僅能檢測TRP，對TRP-XA沒有相關報道，無法進行瑞他莫林起始物料和中間體的中控監測。因TRP和TRP-XA無共軛雙鍵，無紫外吸收，無法采用常規的技術手段-紫外檢測器對樣品進行分析。又因TRP-XA對溫度敏感，溫度高于40℃時，其易生成異構體，采用氣相色譜檢測無法真實監測反應過程。

發明內容

針對現有技術中存在的不足，本發明所要解決的問題是提供一種瑞他莫林起始物料和中間體的檢測方法，本發明可以簡單、快速地監測瑞他莫林合成過程中的起始物料和中間體。

本申請的發明構思如下：采用高效液相色譜對樣品進行分離，采用蒸發光檢測器對樣品進行檢測。同時，因上述化合物的極性較大，在常規C₁₈色譜柱上無保留，本發明采用一種金剛烷基作為填料的色譜柱對樣品進行分析，樣品在色譜柱上保留良好，適合瑞他莫林起始物料和中間體的中控監測分析。

所述的瑞他莫林起始物料和中間體的檢測方法，包括如下步驟：(1)待測樣品溶液的制備：將待測樣品(含有TRP和TRP-XA中的一種或兩種)溶于0.05～0.2％(v：v)甲酸水溶液(本申請中的甲酸水溶液濃度均為體積百分比)中，優選的，所述甲酸水溶液濃度為0.1％(v：v)，配制成待測樣品中單一待測化合物濃度為0.1～2.0mg/mL的溶液，用0.22～0.45μm的微孔濾膜過濾得到樣品溶液。