[發(fā)明專利]核桃肽鈣螯合物及其制備方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201910941091.1 | 申請日： | 2019-09-30 |
| 公開（公告）號： | CN110693033B | 公開（公告）日： | 2022-12-09 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 王豐俊;阮國瑞;金鳳;張國紅 | 申請（專利權(quán)）人： | 北京林業(yè)大學(xué) |
| 主分類號： | A23L33/18 | 分類號： | A23L33/18;A23L33/165 |
| 代理公司： | 北京清亦華知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11201 | 代理人： | 張立 |
| 地址： | 100083 *** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 核桃 肽鈣螯合物 及其 制備 方法 | ||
1.一種核桃肽鈣螯合物的制備方法，其特征在于，包括：
(1)將核桃粕經(jīng)蛋白酶進(jìn)行酶解反應(yīng)，以便獲得酶解產(chǎn)物；
(2)將所述酶解產(chǎn)物進(jìn)行發(fā)酵處理，以便獲得發(fā)酵產(chǎn)物；
(3)對所述發(fā)酵產(chǎn)物進(jìn)行分離處理，以便獲得分子量在5kDa以下的核桃肽；
(4)將所述核桃肽和鈣離子進(jìn)行螯合反應(yīng)，以便制備得到所述核桃肽鈣螯合物；
步驟(1)中所述蛋白酶為堿性蛋白酶，堿性蛋白酶的質(zhì)量占所述核桃粕質(zhì)量的4％-6％；
步驟(2)中所述發(fā)酵處理為利用黑曲霉菌進(jìn)行；
所述黑曲霉菌以菌懸液的形式接種至所述酶解產(chǎn)物中，所述菌懸液的接種量占所述酶解產(chǎn)物的8～20％，所述發(fā)酵處理的溫度為30～35攝氏度，pH為6.0～7.0；
步驟(4)中所述鈣離子來自于無水氯化鈣；所述螯合反應(yīng)為將所述核桃肽和所述無水氯化鈣按照質(zhì)量比為3:1混合進(jìn)行所述螯合反應(yīng)，所述螯合反應(yīng)的溫度為45攝氏度，所述螯合反應(yīng)的pH為8.0，所述螯合反應(yīng)的時(shí)間為40分鐘。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(1)中堿性蛋白酶的質(zhì)量占所述核桃粕質(zhì)量的5%。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述菌懸液的接種量占所述酶解產(chǎn)物的10%。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述發(fā)酵處理的溫度為30攝氏度。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(1)中所述酶解反應(yīng)的溫度為50-60攝氏度，所述酶解反應(yīng)的pH為8-9。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(1)中所述酶解反應(yīng)的溫度為55攝氏度，所述酶解反應(yīng)的pH為8.7。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述酶解反應(yīng)為在55攝氏度條件下恒溫震蕩處理3小時(shí)。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(3)中利用分子量為5kDa的超濾膜對所述發(fā)酵產(chǎn)物進(jìn)行分離處理。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，在步驟(1)之前，進(jìn)一步包括：
利用有機(jī)溶劑對所述核桃粕進(jìn)行脫脂處理，所獲得的脫脂核桃粕過篩，然后再進(jìn)行酶解反應(yīng)。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，在步驟(3)之前，進(jìn)一步包括：
將所述發(fā)酵產(chǎn)物進(jìn)行沸水浴處理，水浴處理時(shí)間為5-15分鐘。
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的制備方法，其特征在于，所述水浴處理時(shí)間為10分鐘。
12.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(4)進(jìn)一步包括：
經(jīng)所述螯合反應(yīng)后的產(chǎn)物利用無水乙醇進(jìn)行洗滌處理，離心獲得沉淀，至上清液加入鈣指示劑不變色終止，獲得所述核桃肽鈣螯合物。
13.一種核桃肽鈣螯合物的制備方法，其特征在于，包括：
1)將核桃粕經(jīng)脫脂處理，脫脂后的核桃粕經(jīng)堿性蛋白酶進(jìn)行酶解反應(yīng)，以便獲得酶解產(chǎn)物；
2)利用黑曲霉菌對所述酶解產(chǎn)物進(jìn)行發(fā)酵處理，以便獲得發(fā)酵產(chǎn)物；
3)利用分子量為5kDa的超濾膜對所述發(fā)酵產(chǎn)物進(jìn)行超濾處理，以便獲得核桃肽；
4)將所述核桃肽和無水氯化鈣按照質(zhì)量比為3:1混合，在溫度為45攝氏度，pH為8.0條件下進(jìn)行螯合反應(yīng)40分鐘，以便制備得到所述核桃肽鈣螯合物。
14.一種核桃肽鈣螯合物，其特征在于，所述核桃肽鈣螯合物通過權(quán)利要求1～12中任一項(xiàng)所述的制備方法或者權(quán)利要求13所述的制備方法制備而成。
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