[發明專利]一種以透明質酸修飾氟化石墨烯為載體的金絲桃素納米復合材料的制備方法

在審

• 申請號: 201910929621.0
• 申請日: 2019-09-27
• 公開（公告）號: CN110585442A
• 公開（公告）日: 2019-12-20
• 發明（設計）人: 王秉;徐城鋒;陳碧玲;曹澳;彭志勤;萬軍民
• 申請（專利權）人: 浙江理工大學
• 主分類號: A61K47/59
• 分類號: A61K47/59;A61K47/61;A61K31/122;A61K41/00;A61P35/00;C01B32/184
• 代理公司: 33304 杭州永航聯科專利代理有限公司
• 代理人: 侯蘭玉

1.一種以透明質酸修飾氟化石墨烯為載體的金絲桃素納米復合材料的制備方法，其特征在于，以mL和mg、g計，包括以下步驟：

1)通過超聲處理將40～60mL濃度為1-3mg/mL的氧化石墨烯分散液和0.5～0.75mL濃度為35-45wt％的氫氟酸混合1～2min，得到混合液，備用；

2)將步驟1)所得混合液轉移到聚四氟乙烯內襯高壓釜中，并在180～200℃下保持30～40h，而后待聚四氟乙烯內襯高壓釜自然冷卻至室溫，備用；

3)使用微孔膜過濾步驟2)所得產物，經過反復洗滌，離心過濾使溶液最終呈中性，然后經冷凍干燥得到氟化石墨烯，備用；

4)取氟化石墨烯，加入水，在冰浴條件下超聲振蕩1～2h，氟化石墨片層剝落，獲得棕黃色的分散液，離心去除沉淀物得到氟化石墨烯水溶液；

5)將氟化石墨烯水溶液透析2～3d，得到純化后的氟化石墨烯分散液，經冷凍干燥處理得到純化的氟化石墨烯，備用；

6)稱取100～150mg氟化石墨烯，并分散在80-120mL去離子水中，超聲分散均勻，然后加入5～7g氫氧化鈉、5～7g次氯酸鈉，超聲浴2～3h，使氟化石墨烯片層上的羥基轉化為羧基；反應完全后，用稀鹽酸中和并反復漂洗，離心處理，收集上層的黑色溶液，然后用水透析40-50h，除去未反應的水溶性物質；

7)稱取100-150mg氟化石墨烯分散在25-50ml DMSO中，加入50-75ml 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽活化攪拌反應3-5h，得到活化的氟化石墨烯溶液；

8)另稱取175-200mg PEI溶解在75-125ml DMSO中，在攪拌下，將所得PEI溶液逐滴加入活化的氟化石墨烯溶液中，在室溫條件下超聲攪拌反應24-36h，透析除去未反應的雜質，冷凍干燥，得到氟化石墨烯-PEI；

9)稱取0.5-0.6g透明質酸溶解在25-50ml水中，并加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽和N-羥基琥珀酰亞胺活化攪拌反應3-5h，得到活化的透明質酸溶液；

10)稱取60-90mg氟化石墨烯-PEI溶解于15-45ml水中，在攪拌下，將氟化石墨烯-PEI溶液逐滴加入到活化的透明質酸溶液中，在室溫條件下攪拌反應24-36h，然后用碳酸氫鈉溶液透析處理，每3-5h換一次水，40-50h后完成透析，除去未反應的雜質；

11)采用旋轉蒸發法去除溶液中的水分，用丙酮反復洗滌，而后于40～50℃下真空干燥，得到透明質酸修飾的氟化石墨烯，備用；

12)取64.8～66.8mg透明質酸修飾的氟化石墨烯，將其分散于40-60mL水中，然后加入6.05～6.25mg金絲桃素，2.76～2.96mg 1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亞胺鹽酸鹽和0.30～0.32mg 4-二甲氨基吡啶，攪拌反應過夜；

13)將步驟12)所得溶液使用超濾管過濾，再經冷凍干燥操作，得到成品。

2.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟4)中，振蕩過程為：使用超聲波粉碎機，在450-550W功率下超聲振蕩0.5-1.5h。

3.如權利要求1或2所述的制備方法，其特征在于，步驟4)中，離心過程為：使用冷凍高速離心機，12000～13000r/min下離心15～20min。

4.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟6)中，離心過程為：使用冷凍高速離心機，在8000～10000r/min下離心15～20min。

5.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟5)中，透析所用透析袋的截留分子量為8000～14000。

6.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟10)中，所述碳酸氫鈉溶液的pH＝7-9。

7.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟13)中，步驟12)所得溶液在使用前，置于3～5℃的環境中預冷。

8.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟13)中，超濾管過濾、冷凍干燥的具體條件為：超濾管的規格為90-110kDa，用水多次洗滌所得濾液，最后進行冷凍干燥處理。