[發明專利]一種夾心法抗原檢測方法及試紙在審
| 申請號: | 201910921772.1 | 申請日: | 2019-09-26 |
| 公開(公告)號: | CN110672841A | 公開(公告)日: | 2020-01-10 |
| 發明(設計)人: | 宋禹 | 申請(專利權)人: | 科赫生物科技(北京)有限公司 |
| 主分類號: | G01N33/558 | 分類號: | G01N33/558 |
| 代理公司: | 11701 北京眾澤信達知識產權代理事務所(普通合伙) | 代理人: | 王曉紅 |
| 地址: | 300450 天*** | 國省代碼: | 天津;12 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 熒光原料 檢測抗體 活化 制備 包被抗體 混合溶液 乙醇溶液 微球 搖勻 溶解 標記檢測抗體 混合溶液中 上清液排除 超聲分散 待測樣品 第二試劑 第一試劑 交聯抗體 抗原檢測 熒光信號 超聲波 夾心法 試管 燒杯 試紙 條帶 團聚 | ||
1.一種夾心法抗原檢測方法,其特征在于,包括:
通過第一試劑向乙醇溶液溶解,制備第一溶液;以及
通過第二試劑向乙醇溶液溶解,制備第二溶液;
將所述第一溶液、第二溶液與熒光原料液進行混合,得到第一混合溶液;
將所述第一混合溶液中的上清液排除,并利用超聲波對所述第一混合溶液進行超聲分散處理,得到活化熒光原料液;
用所述活化熒光原料液標記檢測抗體;
根據標記后的檢測抗體,制備包被抗體;
將待測樣品與所述檢測抗體和所述包被抗體結合;
收集所述檢測抗體發出的熒光信號強度。
2.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,在通過第一試劑向乙醇溶液溶解,制備第一溶液之前,所述方法還包括:
將所述熒光原料進行超聲分散;
向分散后的熒光原料加入超純水進行稀釋,得到所述熒光原料液。
3.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,在將所述第一混合溶液中的上清液排除,并利用超聲波對所述第一混合溶液進行超聲分散處理,得到活化熒光原料液之前,所述方法還包括:
將所述第一混合溶液進行超聲波超聲處理;
將超聲處理后的第一混合溶液進行離心。
4.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,將所述第一溶液、第二溶液與熒光原料液進行混合,得到第一混合溶液包括:
將第一溶液加入所述熒光原料液,并充分混合至均勻,得到第二混合溶液;
向所述第二混合溶液中加入所述第二溶液,并充分混合至均勻,得到第三混合溶液;
將所述第三混合溶液在常溫下靜置第一預設時間,得到所述第一混合溶液。
5.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,將所述第一混合溶液中的上清液排除,并利用超聲波對所述第一混合溶液進行超聲分散處理,得到活化熒光原料液包括:
倒掉所述第一混合溶液中的上清液,得到第四混合溶液;
向所述第四混合溶液中加入超純水,得到第五混合溶液;
將所述第五混合溶液進行超聲波超聲處理,得到所述活化熒光原料液。
6.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,用所述活化熒光原料液標記檢測抗體包括:
將所述檢測抗體加入所述活化熒光原料液中;
將牛血清蛋白加入所述活化熒光原料液中,得到被所述活化熒光原料液標記好的檢測抗體。
7.根據權利要求6所述的方法,其特征在于,在將所述檢測抗體加入所述活化熒光原料液中之后,所述方法還包括:
將加入了檢測抗體的所述活化熒光原料液靜置第二預設時間;
用超聲波超聲處理靜止了第二預設時間后的活化熒光原料液,并在超聲處理后繼續靜置第三預設時間。
8.根據權利要求6所述的方法,其特征在于,將牛血清蛋白加入所述活化熒光原料液中,得到被所述活化熒光原料液標記好的檢測抗體包括:
向加入了檢測抗體的所述活化熒光原料液中加入牛血清蛋白,并封閉第四預設時間;
將封閉所述第四預設時間后的所述活化熒光原料液進行離心處理;
向經過離心處理后的所述活化熒光原料液加入保存液。
9.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,根據標記后的檢測抗體,制備包被抗體包括:
用所述檢測抗體的抗原制備包被液;
根據所述包被液,制作包被墊,形成固相包被抗體。
10.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,所述熒光信號強度與所述待測樣品中的抗原數量成線性正比關系。
11.一種夾心法抗原檢測試紙,其特征在于,根據上述權利要求1至10制作而成,用于檢測待測樣品中抗原的數量。
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