[發明專利]一種快速檢測孕婦可溶性血管內皮生長因子受體-1的免疫層析檢測卡及其制備方法

在審

• 申請號: 201910917627.6
• 申請日: 2019-09-26
• 公開（公告）號: CN110488005A
• 公開（公告）日: 2019-11-22
• 發明（設計）人: 林斯;張衡;韓艷華
• 申請（專利權）人: 天津華科泰生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/558
• 分類號: G01N33/558;G01N33/533;G01N33/543
• 代理公司: 11228 北京匯澤知識產權代理有限公司
• 代理人: 李巖<國際申請>=<國際公布>=<進入國

本發明涉及一種快速檢測孕婦可溶性血管內皮生長因子受體?1的免疫層析檢測卡，包括試紙條，包括試紙條，所述試紙條包括檢測線及質控線，所述檢測線上包被有一株鼠抗人sFlt?1單克隆抗體，所述質控線上包被有羊抗兔多克隆抗體。本發明所提供的快速檢測孕婦可溶性血管內皮生長因子受體?1的免疫層析檢測卡，其可用于血清、血漿和全血的檢測，以用于預測子癇前期相關疾病的診斷。

技術領域

本發明屬于體外診斷領域，涉及一種快速檢測孕婦可溶性血管內皮生長因子受體-1的免疫層析檢測卡及其制備方法。

背景技術

VEGFR是受體酪氨酸激酶(RTK)家族成員，含有細胞外配體結合區，具有七個免疫球蛋白(Ig)樣結構域，跨膜區段和細胞質結構域內的酪氨酸激酶(TK)結構域。該受體與VEGFR-A，VEGFR-B和PLGF結合，在血管生成和血管發生中起重要作用。在血管內皮細胞，胎盤滋養層細胞和外周血單核細胞中發現該受體的表達。內皮細胞表達三種不同的血管內皮生長因子(VEGF)受體，它們被命名為VEGFR-1(Flt-1)，VEGFR-2(KDR/Flk-1)，VEGFR-3(Flt-4)。已經發現了編碼該基因的不同同種型的多種轉錄物變體。包括全長跨膜受體同種型和縮短的可溶性同種型。

Flt-1胞外域剪接后形成可溶性血管內皮生長因子受體-1(sFlt-1)，sFlt-1保留了與PLGF、VEGF結合的高親和力特性，能使PLGF、VEGF的酪氨酸激酶活性喪失，因此認為，sFlt-1是PLGF、VEGF的拮抗劑。sFlt-1與先兆子癇的發作有關。sFlt-1在子癇前期的發病過程中其重要作用，其高表達可降低PLGF、VEGF的表達水平，導致血管生成障礙、內皮細胞損傷，進而影響血管壁的完整性和通透性，出現蛋白尿、水腫和血液濃縮等。體內和體外實驗均證實，胎盤組織缺氧后sFlt-1表達水平上升。

發明內容

有鑒于此，本發明的主要目的在于提供一種快速檢測孕婦可溶性血管內皮生長因子受體-1的免疫層析檢測卡及其制備方法。

為了實現上述目的，本發明提供了如下技術方案：

一種快速檢測孕婦可溶性血管內皮生長因子受體-1的免疫層析檢測卡，包括試紙條，所述試紙條包括檢測線及質控線，所述檢測線上包被有一株鼠抗人sFlt-1單克隆抗體，所述質控線上包被有羊抗兔多克隆抗體。

在本發明的一個具體方案中，其中所述試紙條還包括PVC板，所述PVC板上固定有依次連接的樣品墊、標記物墊、包被墊及吸水墊，所述包被墊上依次設有檢測線及質控線，所述樣品墊和標記物墊連接為一體。

在本發明的一個具體方案中，其中所述包被墊靠近檢測線的一端連接有標記物墊，靠近質控線的一端連接有吸水墊。

在本發明的一個具體方案中，其中所述標記物墊上包被有另一株鼠抗人sFlt-1單克隆抗體標記的表面活化的熒光乳膠微球和兔IgG標記的表面活化的熒光乳膠微球，所述另一株鼠抗人sFlt-1單克隆抗體標記的表面活化的熒光乳膠微球和兔IgG標記的表面活化的熒光乳膠微球的摩爾比為1:(0.2～4)。

在本發明的一個具體方案中，其中所述快速檢測孕婦可溶性血管內皮生長因子受體-1的免疫層析檢測卡還包括用于卡設試紙條的卡殼。

在本發明的一個具體方案中，其中所述卡殼包括：

底槽，其連接于所述PVC板；

上蓋，其連接于所述底槽，所述上蓋上設置有用于向所述樣品墊上加樣的加樣孔；

觀察窗，其設置于上蓋上并用于檢測線和質控線的數據采集。

一種快速檢測孕婦可溶性血管內皮生長因子受體-1的免疫層析檢測卡的制備方法，包括以下步驟：

1)包被墊的制備：將一株鼠抗人sFlt-1單克隆抗體和羊抗兔多克隆抗體分別包被到硝酸纖維素膜上，干燥備用；