[發明專利]一種快速檢測潤楠葉枯病的引物、試劑盒和檢測方法在審
| 申請號： | 201910914666.0 | 申請日： | 2019-09-26 |
| 公開（公告）號： | CN110468233A | 公開（公告）日： | 2019-11-19 |
| 發明（設計）人： | 韓珊;汪昱伶;朱天輝;李姝江;譙天敏;王明;姜耀榮;衣建民;李硯鉞 | 申請（專利權）人： | 四川農業大學 |
| 主分類號： | C12Q1/6895 | 分類號： | C12Q1/6895;C12Q1/6848;C12Q1/04;C12N15/11 |
| 代理公司： | 51229 成都正華專利代理事務所(普通合伙) | 代理人： | 肖芳<國際申請>=<國際公布>=<進入國 |
| 地址： | 625000 四*** | 國省代碼： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 引物 快速檢測 葉片DNA 檢測擴增產物 最佳防治時期 盤多毛孢菌 擴增條帶 有效解決 巢式PCR 傳統的 試劑盒 葉枯病 耗材 葉片 耗時 診斷 檢測 | ||
【權利要求書】：
1.一種快速檢測潤楠葉枯病的引物，其特征在于，所述引物序列為：F：5’-GAACTTACCATTGTTGCCTCG-3’，R：5’-CGCCGTTGTATTTCAGGAG-3’。
2.采用權利要求1所述引物快速檢測潤楠葉枯病的方法，其特征在于，包括以下步驟：
(1)提取潤楠葉片DNA；
(2)以潤楠葉片DNA為模板，采用權利要求1所述的引物進行巢式PCR反應；
(3)檢測擴增產物，當PCR產物呈現578bp的擴增條帶時，即表明葉片中含有致其葉枯病的小孢擬盤多毛孢菌。
3.如權利要求2所述的快速檢測潤楠葉枯病的方法，其特征在于，步驟(2)中巢式PCR擴增體系25μL包括：DNA模板1μL，上下游引物各1μL，TaqDNA聚合酶22μL。
4.如權利要求2所述的快速檢測潤楠葉枯病的方法，其特征在于，步驟(2)中擴增程序：98℃預變性2min，98℃變性10s，63℃退火10s，72℃延伸20s，共34個循環，72℃延伸2min。
5.一種快速檢測潤楠葉枯病的試劑盒，其特征在于，包括：權利要求1所述的引物、潤楠葉片DNA提取試劑盒和TaqDNA聚合酶。
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