[發(fā)明專利]一種魷魚墨海洋微生物培養(yǎng)基的制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201910911057.X
• 申請日: 2019-09-25
• 公開（公告）號: CN110564618B
• 公開（公告）日: 2023-05-02
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 郭健;宋文東;蔡璐;紀麗麗;王亞寧;王振
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江海洋大學(xué)
• 主分類號: C12N1/00
• 分類號: C12N1/00
• 代理公司: 杭州浙科專利事務(wù)所(普通合伙) 33213
• 代理人: 吳秉中

1.一種魷魚墨海洋微生物培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于：包括以下步驟為：

S1.配置缺少氮源、碳源的不完全培養(yǎng)基：加入MgSO₄，使其質(zhì)量分數(shù)為0.01-0.04%，加入KH₂PO₄，使其質(zhì)量分數(shù)為0.11-0.14%，加入牛肉膏，使其質(zhì)量分數(shù)0.05%-0.1%，加入人工海水調(diào)配，使其質(zhì)量分數(shù)為3-3.5%，用0.1mol/L的NaOH溶液調(diào)節(jié)混合液pH至7.0-7.4，高溫滅菌得到滅菌完成的不完全培養(yǎng)基；

S2.培養(yǎng)基的制備：將魷魚墨與滅菌人工海水按照質(zhì)量體積比1:60-90混合，調(diào)節(jié)pH至7.0-7.4，消毒，于超凈工作臺中將魷魚墨-海水混合液與步驟S1得到的不完全培養(yǎng)基、滅菌改性硅藻土混勻，得到魷魚墨海洋微生物培養(yǎng)基；

所述改性硅藻土為葛仙米糖蛋白/硅藻土復(fù)合材料；

所述改性硅藻土的制備方法為將葛仙米糖蛋白加入0.5wt%的木醋液溶液中溶解，攪拌后加入硅藻土，繼續(xù)攪拌混合均勻，40℃烘干研細，得到改性硅藻土；

所述葛仙米糖蛋白的制備方法為將葛仙米干粉加入水中沸水提取1-2h，離心，濃縮至相對密度為2-2.5，加入75%的乙醇沉淀，得到黏性蛋白產(chǎn)物后加入混合有機溶劑，攪拌后靜置24h，收集上清液，加入75%的乙醇沉淀，離心，收集沉淀，得到葛仙米糖蛋白。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述魷魚墨海洋微生物培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于：所述葛仙米糖蛋白與木醋液的質(zhì)量體積比為1：20-50，所述葛仙米糖蛋白與硅藻土的質(zhì)量比為1:5-10。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述魷魚墨海洋微生物培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于：所述攪拌混合為200-500r/min攪拌1h。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述魷魚墨海洋微生物培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于：所述75%的乙醇與濃縮液的體積比為1：3-7；所述75%的乙醇與上清液的體積比為1：3-7；所述黏性蛋白產(chǎn)物與混合有機溶劑的質(zhì)量體積比為1：5-10；所述沉淀溫度為0-20℃；所述離心轉(zhuǎn)速為5000-10000r/min，離心時間5min；所述混合有機溶劑為正丁醇、二氯甲烷和丙酮按照體積比1:1:1混合。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述魷魚墨海洋微生物培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于：所述高溫滅菌為115-125℃加熱滅菌40min；所述消毒為72℃下消毒15s。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述魷魚墨海洋微生物培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于：所述魷魚墨-海水混合液、不完全培養(yǎng)基和滅菌改性硅藻土的質(zhì)量比為10:10:2-7。

7.一種如權(quán)利要求1-6任一所述制備方法制得的魷魚墨海洋微生物培養(yǎng)基。

8.一種如權(quán)利要求1-6任一所述制備方法制得的魷魚墨海洋微生物培養(yǎng)基在培養(yǎng)海洋微生物中的應(yīng)用。