[發明專利]一種梔子配方顆粒指紋圖譜的測定方法

在審

• 申請號: 201910906258.0
• 申請日: 2019-09-24
• 公開（公告）號: CN110554124A
• 公開（公告）日: 2019-12-10
• 發明（設計）人: 方同華;閆久江;王喜軍;韓冰;董麗麗
• 申請（專利權）人: 哈爾濱珍寶制藥有限公司;黑龍江珍寶島藥業股份有限公司
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/74;G01N30/86
• 代理公司: 11470 北京精金石知識產權代理有限公司
• 代理人: 宋秀蘭

1.一種梔子配方顆粒指紋圖譜的測定方法，其包括如下步驟：

S1 對照品溶液的制備：取梔子苷對照品用甲醇溶解稀釋，制成對照品溶液；

S2 供試品溶液的制備：取梔子配方顆粒，提取，濾過，取續濾液，即得供試品溶液；

S3 采用高效液相色譜法測得指紋圖譜，其中流動相A為乙腈，流動相B為體積濃度為0.05-2％的磷酸水溶液，梯度洗脫。

2.根據權利要求1所述的梔子配方顆粒指紋圖譜的測定方法，S1所述對照品溶液的濃度為0.01-10mg/mL。

3.根據權利要求1所述的梔子配方顆粒指紋圖譜的測定方法，S3中所述高效液相色譜法的色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；檢測波長為238nm；梯度洗脫時間為90分鐘；柱溫為20-40℃；流速為每分鐘1-3mL。

4.根據權利要求1所述的梔子配方顆粒指紋圖譜的測定方法，S3中所述梯度洗脫為：0-24min，流動相A 5％，流動相B 95％；25-39min，流動相A 15％，流動相B 85％；40-79min，流動相A 20％，流動相B 80％；80-89min，流動相A 40％，流動相B 60％；90min，流動相A50％，流動相B 50％。

5.根據權利要求1所述的梔子配方顆粒指紋圖譜的測定方法，所述測定方法還包括如下步驟：

S4 將10-20批供試品的指紋圖譜采用相對保留時間方式標定共有指紋峰，確定相對偏差大小生成對照圖譜；

S5 將10-20批供試品的指紋圖譜通過中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統進行相似度的比對，確定特征峰。

6.根據權利要求5所述的梔子配方顆粒指紋圖譜的測定方法，S4中所述相對偏差不超過±3％。

7.根據權利要求5所述的梔子配方顆粒指紋圖譜的測定方法，S5中所述特征峰有6個，峰號依次記為1-6，以6號峰梔子苷的特征峰為參比峰，出峰時間記為1min，其余各特征峰的相對保留時間分別為：0.41、0.48、0.53、0.69和0.84。

8.根據權利要求5所述的梔子配方顆粒指紋圖譜的測定方法，S5中所述相似度≥0.998。

9.根據權利要求1-8中任一項所述的梔子配方顆粒指紋圖譜的測定方法，S2中所述提取是指向梔子配方顆粒中加入濃度為40-60％的甲醇水溶液后超聲處理20-40分鐘。

10.根據權利要求1-8中任一項所述的梔子配方顆粒指紋圖譜的測定方法，S3中高效液相色譜法色譜柱的規格為4.6mm×250mm，填料粒徑4-6μm；進樣量為5-20μL。