[發(fā)明專利]靶向前列腺癌的增強(qiáng)型CAR-T細(xì)胞及其制備方法和藥物

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201910901543.3
• 申請日: 2019-09-23
• 公開（公告）號: CN110564695A
• 公開（公告）日: 2019-12-13
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張娜;杜冰;吳詩佳;劉小紅;殷宏翔;劉明耀
• 申請（專利權(quán)）人: 華東師范大學(xué);上海邦耀生物科技有限公司
• 主分類號: C12N5/10
• 分類號: C12N5/10;C12N15/867;A61K39/00;A61P35/00
• 代理公司: 11463 北京超凡宏宇專利代理事務(wù)所(特殊普通合伙)
• 代理人: 周文波

本發(fā)明公開了靶向前列腺癌的增強(qiáng)型CAR?T細(xì)胞及其制備方法和藥物，涉及免疫治療技術(shù)領(lǐng)域。該CAR?T細(xì)胞的細(xì)胞膜上表達(dá)有第一受體和第二受體，第一受體為嵌合抗原受體，嵌合抗原受體具有結(jié)合前列腺癌抗原的抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域；第二受體包括位于胞外的特異性結(jié)合TGFβ的TGFβ結(jié)合結(jié)構(gòu)域和位于胞內(nèi)的持續(xù)激活I(lǐng)L?7信號通路的IL?7激活信號傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域。本發(fā)明提供的CAR?T細(xì)胞可以靶向前列腺癌，中和腫瘤微環(huán)境中TGFβ對T細(xì)胞的抑制作用，同時激活I(lǐng)L?7?STAT 5信號通路促進(jìn)T細(xì)胞的增殖和存活，該CAR?T細(xì)胞具有增強(qiáng)的抗腫瘤活性，可用于前列腺癌的治療。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及免疫治療技術(shù)領(lǐng)域，具體而言，涉及一種靶向前列腺癌的增強(qiáng)型CAR-T細(xì)胞及其制備方法和藥物。

背景技術(shù)

嵌合抗原受體(CAR)修飾的T細(xì)胞(CAR-T)的過繼細(xì)胞療法是目前最有前景的免疫治療方法，尤其是針對難治性白血病和淋巴瘤，取得了巨大的成效。但是在實體癌例如前列腺癌方面，治療效果卻不盡人意。

鑒于此，特提出本發(fā)明。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種靶向前列腺癌的增強(qiáng)型CAR-T細(xì)胞及其制備方法和藥物。本發(fā)明提供的CAR-T細(xì)胞可以靶向前列腺癌，并具有抑制TGFβ信號通路同時激活I(lǐng)L-7信號通路的特點，該CAR-T細(xì)胞具有增強(qiáng)的抗腫瘤活性。

本發(fā)明是這樣實現(xiàn)的：

前列腺癌是男性中發(fā)病率和死亡率都很高的疾病。并且易復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移。利用免疫療法雖有一定的效果，但療效不好的原因之一是：在惡性腫瘤微環(huán)境中，有多種機(jī)制能夠抑制免疫細(xì)胞反應(yīng)，如抑制細(xì)胞和細(xì)胞結(jié)合的可溶性因子，抑制這些因子如PD-1和CTLA-4在一定程度可以清除部分腫瘤細(xì)胞，但后期若發(fā)展為去勢抵抗性前列腺癌則對這些抑制劑的效果不響應(yīng)。但在很多腫瘤特別是前列腺癌中，發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)化生長因子(TGFβ)大量表達(dá)。TGFβ在腫瘤組織中大量積聚，誘導(dǎo)許多細(xì)胞外變化介質(zhì)的表達(dá)。TGFβ在調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)的起始，發(fā)展，維持和消退方面具有重要作用，是一種有效的免疫抑制劑。大多數(shù)惡性腫瘤細(xì)胞可以通過TGFβ的過量產(chǎn)生逃避宿主免疫監(jiān)視和促進(jìn)自身發(fā)展。

TGFβ大量表達(dá)會抑制IL-2的表達(dá)，因此抑制IL-2引起的T細(xì)胞的擴(kuò)增。IL-7可以替代IL-2調(diào)節(jié)TGFβ抗性。IL-7信號傳導(dǎo)是T細(xì)胞在其整個生命過程中賴以生存的必須因素，且所有淋巴細(xì)胞的早期發(fā)育階段都需要通過IL-7的介入來完成。在T細(xì)胞中，IL-7是促使T細(xì)胞成熟和分化的非冗余細(xì)胞因子，并且它對于外周淋巴組織中成熟T細(xì)胞存活仍然是必需的。

前列腺特異性膜抗原(prostrate specific membrane antigen，PSMA)其在前列腺癌中高表達(dá)，在正常組織中不表達(dá)或者低表達(dá)，已有多種證據(jù)表明是免疫治療前列腺癌的理想靶點，利用靶向PSMA的CAR-T細(xì)胞在腫瘤免疫治療中顯示出極大的特異性，靶向性和較少的主要組織相容性復(fù)合物限制，在臨床前研究及臨床實驗中證明了CAR-T細(xì)胞的有效性和安全性，但其應(yīng)用仍有局限，所以還需要進(jìn)一步的研究和探索。

基于此，第一方面，本發(fā)明實施例提供一種增強(qiáng)型CAR-T細(xì)胞，所述CAR-T細(xì)胞的細(xì)胞膜上表達(dá)有第一受體和第二受體；

所述第一受體為嵌合抗原受體，所述嵌合抗原受體具有結(jié)合前列腺癌抗原的抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域；

所述第二受體包括位于胞外的特異性結(jié)合TGFβ的TGFβ結(jié)合結(jié)構(gòu)域和位于胞內(nèi)的持續(xù)激活I(lǐng)L-7信號通路的IL-7激活信號傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域IL-7。

本發(fā)明提供的增強(qiáng)型CAR-T細(xì)胞通過結(jié)合前列腺癌抗原的抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域靶向前列腺癌，利用TGFβ結(jié)合結(jié)構(gòu)域結(jié)合TGFβ，減少TGFβ對腫瘤細(xì)胞的促進(jìn)和其對T細(xì)胞的免疫抑制作用；利用IL-7激活信號傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域持續(xù)傳導(dǎo)IL-7信號以代替IL-2，促進(jìn)CAR-T細(xì)胞的增殖存活，進(jìn)而增強(qiáng)其對前列腺癌的殺傷能力。