[發明專利]NDUFA13在制備自發性肝炎-肝纖維化動物模型、及制備藥物中的應用有效
| 申請號： | 201910879009.7 | 申請日： | 2019-09-17 |
| 公開（公告）號： | CN111019970B | 公開（公告）日： | 2023-08-08 |
| 發明（設計）人： | 黃軼;王欣;薛炳乾;葉庭菠;李銳;徐小惠;黃道超;曾欣 | 申請（專利權）人： | 重慶醫科大學附屬兒童醫院 |
| 主分類號： | C12N15/85 | 分類號： | C12N15/85;A01K67/027;G01N33/68 |
| 代理公司： | 重慶弘旭專利代理有限責任公司 50209 | 代理人： | 文巍 |
| 地址： | 400014 *** | 國省代碼： | 重慶;50 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | ndufa13 制備 自發 性肝炎 纖維化 動物 模型 藥物 中的 應用 | ||
【權利要求書】：
1.NDUFA13基因在構建非感染性肝纖維化動物模型中的應用。
2.一種非感染性肝纖維化動物模型的構建方法，其特征在于，應用NDUFA13flox/-小鼠及Alb-cre小鼠品系，雜交構建NDUFA13flox/-Alb-cre小鼠品系。
3.如權利要求2所述的動物模型的構建方法，包括以下步驟：
（1）確定目的基因：小鼠NDUFA13基因的外顯子3作為條件性敲除區域；
（2）設計與構建打靶載體質粒，使用來自C57BL/6J文庫的BAC克隆RP23-74A9或RP23-114L20作為模板，通過PCR產生同源臂和CKO區域；在打靶載體中，Neo盒的側翼為Frt位點，CKO區域的側翼為LoxP位點；
（3）ES細胞電轉和陽性克隆篩選，進行ES細胞顯微注射和制備嵌合體，嵌合體小鼠與Flp小鼠雜交，敲除NEO抗性基因，獲得NDUFA13flox/-F1小鼠；繁殖獲得后代小鼠并鑒定，與野生型小鼠C57B/L6合籠繁殖傳代；
（4）將NDUFA13flox/-小鼠與Alb-cre小鼠合籠，鑒定獲得NDUFA13flox/-Alb-cre小鼠，建立NDUFA13flox/-Alb-cre小鼠品系。
4.如權利要求2或3所述動物模型的構建方法用于自發性肝纖維化動物模型的構建。
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