[發(fā)明專利]TCRγδ為靶點(diǎn)的嵌合抗原受體及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201910875313.4
• 申請日: 2019-09-17
• 公開（公告）號: CN110615847B
• 公開（公告）日: 2021-07-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張同存;祝海川;張子健
• 申請（專利權(quán)）人: 武漢波睿達(dá)生物科技有限公司
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N15/66;C12N15/867;C12N5/10;A61K39/00;A61P35/00;A61P35/02
• 代理公司: 武漢科皓知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 42222
• 代理人: 艾小倩

1.一種嵌合型抗原受體，其特征在于，從N端到C端順次拼接信號肽、識別并結(jié)合腫瘤細(xì)胞表面TCRγδ的單鏈抗體ScFv、Strep tagⅡ、CD8鉸鏈區(qū)、CD28跨膜區(qū)、CD28胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域、4-1BB、CD3ζ、F2A、IL-7、F2A、CCL19；所述單鏈抗體ScFv由重鏈可變區(qū)V_H、連接多肽Linker、輕鏈可變區(qū)V_L組成；所述重鏈可變區(qū)V_H的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述輕鏈可變區(qū)V_L的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述F2A的氨基酸序列如SEQ ID NO.15所示，所述IL-7的氨基酸序列如SEQ ID NO.16所示，所述CCL19的氨基酸序列如SEQ ID NO.17所示

2.一種嵌合型抗原受體，其特征在于，從N端到C端順次拼接信號肽、識別并結(jié)合腫瘤細(xì)胞表面TCRγδ的單鏈抗體ScFv、Strep tagⅡ、CD8鉸鏈區(qū)、CD28跨膜區(qū)、4-1BB、CD3ζ，所述單鏈抗體ScFv由重鏈可變區(qū)V_H、連接多肽Linker、輕鏈可變區(qū)V_L組成；所述重鏈可變區(qū)V_H的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示，所述輕鏈可變區(qū)V_L的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示。

3.一種重組嵌合型抗原受體的基因載體，其特征在于，包括以慢病毒、腺病毒、腺相關(guān)病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒、轉(zhuǎn)座子載體或非病毒瞬時(shí)表達(dá)載體為骨架，插入如權(quán)利要求1-2任一項(xiàng)所述的嵌合型抗原受體的編碼核苷酸序列。

4.一種表達(dá)嵌合型抗原受體的免疫細(xì)胞，其特征在于，由編碼權(quán)利要求1-2任一項(xiàng)所述的嵌合型抗原受體的核苷酸序列或權(quán)利要求3所述的重組嵌合型抗原受體基因載體轉(zhuǎn)染免疫細(xì)胞得到，所述免疫細(xì)胞選自臍帶血、外周血或IPSC來源的T細(xì)胞、NK細(xì)胞、NKT細(xì)胞、αβT細(xì)胞、CD4+T細(xì)胞，CD8+T細(xì)胞；所述嵌合型抗原受體的單鏈抗體ScFv結(jié)合腫瘤細(xì)胞表面的TCRγδ。

5.一種權(quán)利要求1-2任一項(xiàng)所述的嵌合型抗原受體或權(quán)利要求3所述的重組嵌合型抗原受體的基因載體或權(quán)利要求4所述的表達(dá)嵌合型抗原受體免疫細(xì)胞在制備治療淋巴細(xì)胞白血病的藥物中的用途。

6.編碼權(quán)利要求2所述的嵌合抗原受體的核苷酸序列轉(zhuǎn)染T細(xì)胞得到的表達(dá)嵌合型抗原受體的免疫細(xì)胞和糖皮質(zhì)激素組成的藥物組合物在制備治療淋巴細(xì)胞白血病的藥物中的用途。