[發明專利]一種具有緩釋性的納米顆粒包被的抗菌肽及其制備方法

有效

• 申請號: 201910872542.0
• 申請日: 2019-09-16
• 公開（公告）號: CN110496229B
• 公開（公告）日: 2022-09-23
• 發明（設計）人: 徐金富;楊玲
• 申請（專利權）人: 上海市肺科醫院
• 主分類號: A61K47/69
• 分類號: A61K47/69;A61K47/64;A61K38/16;A61P31/04
• 代理公司: 上海卓陽知識產權代理事務所(普通合伙) 31262
• 代理人: 周春洪

本發明涉及一種具有緩釋性的納米顆粒包被的抗菌肽，包括納米載藥系統和負載在納米載藥系統上的抗菌肽，所述納米載藥系統為被還原的BSA分子，所述抗菌肽為經過巰基修飾的陽離子抗菌肽LL37，所述納米載藥系統被還原后暴露出巰基，再與抗菌肽通過二硫鍵連接，合成具有緩釋性的納米顆粒包被的抗菌肽。本發明還涉及上述納米顆粒包被的抗菌肽的制備方法。本發明的制備納米顆粒的技術方法簡單，耗時較短，且易操作，利用二硫鍵之間的交聯，使LL37成功包被在BSA這一載藥體系中，這種化學交聯方式使LL37在藥物傳輸過程中不易被降解，并能夠發揮靶向作用，可應用于多種抗菌肽甚至不同抗生素的制備工藝中，為將來臨床上各種藥物的制備提供了一種新思路。

技術領域

本發明涉及生物醫藥技術領域，具體地說，是一種具有緩釋性的納米顆粒包被的抗菌肽及其制備方法。

背景技術

納米材料由于其表面效應和小尺寸效應等優勢廣泛的應用于生物醫學領域。在納米材料中，納米載藥體系由于其諸多優點成為了材料與醫學領域研究的熱點。納米載藥體系指的是利用聚合物作為載體，將小分子的藥物通過物理或化學方式以包封或者吸附的方式結合在其中，形成尺寸在納米級別的藥物。納米載藥的載體一般會選擇生物相容性較高，或可進行修飾的聚合物。這一類載體可以人工合成的也可以是天然的。與傳統的藥物治療手段不同，納米載藥主要具有一下的優勢，第一是改善藥物的溶解性并增強藥物的穩定性，在藥物到達治療部位之前，盡量減少藥物的損失；第二是提高藥物的組織滲透性，膜透過能力和，增加給藥途徑；第三是增加藥物的靶向性，提高藥物的利用率，納米載藥體系在被修飾后，可以使納米藥物在到達機體的病變部位后才釋放出有效的藥物分子，發揮藥效；第四是具有調節緩釋控制釋放的作用。

LL37是迄今為止在人體中發現的唯一一種陽離子抗菌肽。由于LL37對多種革蘭陽性菌和革蘭陰性菌具有殺傷作用，其中包括銅綠假單胞菌、淋病奈瑟菌、肺炎克雷伯菌、金黃色葡萄球菌等，因此LL37成為機體固有免疫的重要組成部分。LL37的抗菌活性前景廣闊，同時具有多重生物活性，它被視為抗多重耐藥細菌感染的新的希望。然而，目前由于體外制備抗菌肽費用高昂、存在抗原性、且直接回輸極易被滅活等多種原因，使其應用得到了大大的限制，至今為止仍未用于臨床。

牛血清白蛋白(BSA)具有低毒性，低免疫原性，穩定性強能共結合多種藥物等優勢。BSA作為藥物緩釋的載體具有廣泛的應用前景。王樹斌等人的研究表明表皮生長因子偶聯牛血清白蛋白納米粒荷載紫杉醇室溫穩定性與血清穩定性均高于未被納米粒包被的紫杉醇。肺部因其特殊的生理結構而適合作為局部或全身用藥的給藥部位。

利用常規戊二醛交聯的方式可能使LL37分子之間交聯，但是這種交聯方式不利于維持LL37的生物活性。因此我們提出利用BSA分子之間的交聯同時保持LL37結構完整，以時空擴增電荷密度的方案，此方案可以提高LL37的負載率并有助于穩定納米結構，目前，關于該方面的研究還未見報道。

發明內容

本發明的第一個目的是，針對現有技術中的不足，提供一種具有緩釋性的納米顆粒包被的抗菌肽。

本發明的第二個目的是，提供一種上述抗菌肽的制備方法。

為實現上述第一個目的，本發明采取的技術方案是：

一種具有緩釋性的納米顆粒包被的抗菌肽，包括納米載藥系統和負載在納米載藥系統上的抗菌肽，所述納米載藥系統為被還原的BSA分子，所述抗菌肽為經過巰基修飾的陽離子抗菌肽LL37，所述納米載藥系統被還原后暴露出巰基，再與抗菌肽通過二硫鍵連接，合成具有緩釋性的納米顆粒包被的抗菌肽。

優選地，所述被還原的BSA分子由下述方法制備得到：利用二硫蘇糖醇處理BSA分子，BSA分子的二硫鍵被裂解并暴露出巰基，再利用十二烷基硫酸鈉的作用使BSA分子暴露更多的巰基。

優選地，所述納米顆粒包被的抗菌肽由下述方法制備得到：