[發明專利]一種具有緩釋性的納米顆粒包被的抗菌肽及其制備方法

有效

• 申請號: 201910872542.0
• 申請日: 2019-09-16
• 公開（公告）號: CN110496229B
• 公開（公告）日: 2022-09-23
• 發明（設計）人: 徐金富;楊玲
• 申請（專利權）人: 上海市肺科醫院
• 主分類號: A61K47/69
• 分類號: A61K47/69;A61K47/64;A61K38/16;A61P31/04
• 代理公司: 上海卓陽知識產權代理事務所(普通合伙) 31262
• 代理人: 周春洪

1.一種具有緩釋性的納米顆粒包被的抗菌肽，包括納米載藥系統和負載在納米載藥系統上的抗菌肽，其特征在于，所述納米載藥系統為被還原的BSA分子，所述抗菌肽為經過巰基修飾的陽離子抗菌肽LL37，所述納米載藥系統被還原后暴露出巰基，再與抗菌肽通過二硫鍵連接，合成具有緩釋性的納米顆粒包被的抗菌肽，所述BSA和抗菌肽LL37的質量比為9：1，所述被還原的BSA分子由下述方法制備得到：利用二硫蘇糖醇處理BSA分子，BSA分子的二硫鍵被裂解并暴露出巰基，再利用十二烷基硫酸鈉的作用使BSA分子暴露更多的巰基。

2.根據權利要求1所述的納米顆粒包被的抗菌肽，其特征在于，所述納米顆粒包被的抗菌肽由下述方法制備得到：

1）將BSA，二硫蘇糖醇和十二烷基硫酸鈉溶于無菌的雙蒸水中，使BSA的終濃度為40mg/ml，將溶液在250r/min的磁力攪拌下進行70℃的水浴加熱，得到還原的BSA溶液；

2）將的還原的BSA溶液用緩沖液稀釋，將被稀釋的BSA溶液加入到24孔板中，置于37℃的振蕩器，以350r/min反應4.5 h，合成BSA納米顆粒；

3）將BSA和抗菌肽LL37加入到24孔板中，并置于37℃溫度控制的振蕩器中，轉速為350r/min，4.5小時后合成LL37納米顆粒；

4）使用超濾的方法去除納米顆粒中的十二烷基硫酸鈉，獲得具有緩釋性的納米顆粒包被的抗菌肽。

3.根據權利要求2所述的納米顆粒包被的抗菌肽，其特征在于，步驟1）中所述BSA，二硫蘇糖醇和十二烷基硫酸鈉的質量比為80：3：40。

4.根據權利要求3所述的納米顆粒包被的抗菌肽，其特征在于，步驟2）中所述緩沖液為pH=4.8的2-（N-嗎啉代）乙磺酸溶液，稀釋后的還原的BSA溶液濃度為1 mg/ml。

5.權利要求1所述的納米顆粒包被的抗菌肽的制備方法，其特征在于，所述制備方法包括下述步驟：

1）將BSA，二硫蘇糖醇和十二烷基硫酸鈉溶于無菌的雙蒸水中，BSA的終濃度為40 mg/ml，將溶液在250r/min的磁力攪拌下進行70℃的水浴加熱，得到還原的BSA溶液；

2）將還原的BSA溶液用緩沖液稀釋，將被稀釋的BSA溶液加入到24孔板中，置于37℃的振蕩器，以350r/min反應4.5 h，合成BSA納米顆粒；

3）將BSA和抗菌肽LL37加入到24孔板中，并置于37℃溫度控制的振蕩器中，轉速為350r/min，4.5小時后合成LL37納米顆粒；

4）使用超濾的方法去除納米顆粒中的十二烷基硫酸鈉，獲得具有緩釋性的納米顆粒包被的抗菌肽。

6.根據權利要求5所述的制備方法，其特征在于，步驟1）中所述BSA，二硫蘇糖醇和十二烷基硫酸鈉的質量比為80：3：40。

7.根據權利要求6所述的制備方法，其特征在于，步驟2）中所述緩沖液為pH=4.8的2-（N-嗎啉代）乙磺酸溶液，稀釋后的還原的BSA溶液濃度為1 mg/ml。