[發(fā)明專利]腫瘤觸發(fā)靶向碳酸氫銨脂質體及制備方法、應用

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201910864090.1
• 申請日: 2019-09-12
• 公開（公告）號: CN110522725A
• 公開（公告）日: 2019-12-03
• 發(fā)明（設計）人: 鄒濤;陳淑窈;李莉;夏甜;李游
• 申請（專利權）人: 武漢科技大學
• 主分類號: A61K9/127
• 分類號: A61K9/127;A61K47/24;A61K47/10;A61K47/28;A61K31/704;A61P35/00
• 代理公司: 11427 北京科家知識產權代理事務所(普通合伙)
• 代理人: 陳娟<國際申請>=<國際公布>=<進入國

本發(fā)明公開了一種腫瘤觸發(fā)靶向碳酸氫銨脂質體的制備方法、應用。利用磷脂酰乙醇胺(PE)和甲氧基聚乙二醇醛(mPEG?CHO)合成了含有pH敏感的亞胺鍵的長鏈PEG化磷脂(PE?imine?PEG)。然后以磷脂、膽固醇、PE?imine?PEG、DSPE?PEG?folate和碳酸氫銨(ABC)水溶液為原料，制備腫瘤觸發(fā)靶向碳酸氫銨脂質體納米材料。本發(fā)明的腫瘤觸發(fā)靶向碳酸氫銨脂質體不僅具有血液中的長循環(huán)特性，而且在腫瘤微環(huán)境中能開啟其靶向特性。通過葉酸配體?受體作用，它能進入腫瘤細胞，在升高的溫度或酸性的內涵體/溶酶體中會產生二氧化碳(CO₂)氣泡。通過產生的CO₂氣泡在磷脂雙分子層中產生可滲透的缺陷，在細胞內快速釋放藥物，消滅腫瘤細胞。

技術領域

本發(fā)明涉及腫瘤觸發(fā)靶向碳酸氫銨脂質體納米材料，本發(fā)明還涉及該腫瘤觸發(fā)靶向碳酸氫銨脂質體納米材料的制備方法，該腫瘤觸發(fā)靶向碳酸氫銨脂質體納米材料可用作抗腫瘤藥物載體。

背景技術

在過去的幾十年中，納米醫(yī)學為癌癥治療新策略的發(fā)展提供了許多令人興奮的新機會。由于實體瘤中異常的血管結構和無效的淋巴引流，納米粒子可通過血液循環(huán)中增強的通透性和保留(EPR)效應在腫瘤組織中積聚。此外，研究者已開發(fā)出刺激響應納米粒子以實現(xiàn)腫瘤特異性治療。刺激包括外源刺激(例如，溫度，磁場，光，超聲等)和內源刺激(例如，降低的pH，某些酶和腫瘤組織周圍的缺氧)。

溫敏脂質體是目前最先進的刺激響應納米粒子之一，非常有希望用于臨床應用。阿霉素(DOX)可以在升高的溫度(≥40℃)下從碳酸氫銨(ABC)脂質體快速釋放，并改善脂質體在正常體溫(37℃)下的靜脈穩(wěn)定性。然而，由于含有聚乙二醇化脂質(DSPE-PEG)，ABC脂質體難以進入細胞。聚乙二醇化脂質可以延長ABC脂質體的循環(huán)時間，但阻礙它們進入細胞。因此，ABC脂質體只能在細胞外釋放藥物。然而，在化療中細胞內藥物釋放通常比細胞外藥物釋放更為理想。

因此，我們利用葉酸功能化的聚乙二醇化脂質(DSPE-PEG-folate)替代了ABC脂質體中的DSPE-PEG，以改善ABC脂質體的細胞攝取。為了保持ABC脂質體在血液中的長循環(huán)特性，我們合成了含有pH敏感的亞胺鍵的長鏈PEG化磷脂(DSPE-imine-PEG)并將其加入脂質體中。腫瘤觸發(fā)靶向ABC(TT-ABC)脂質體在血液循環(huán)期間，由于長鏈PEG屏蔽了脂質體表面的葉酸基團，其靶向特性關閉；但是在微酸性的腫瘤微環(huán)境中，由于pH敏感的亞胺鍵斷裂，長鏈PEG從脂質體表面脫離，露出脂質體表面的葉酸配體，其靶向特性開啟。通過葉酸配體-受體作用，TT-ABC脂質體被腫瘤細胞胞吞后，在升高的溫度或酸性的內體/溶酶體中會產生二氧化碳(CO₂)氣泡。通過產生的CO₂氣泡在磷脂雙分子層中產生可滲透的缺陷，因此，包載DOX的TT-ABC脂質體(DOX@TT-ABC)可以在細胞內快速釋放藥物(附圖1)。DOX@TT-ABC在生理pH(7.4)下表現(xiàn)出良好的穩(wěn)定性，并在降低的pH(≤6.5)和升高的溫度(≥40℃)下快速釋放DOX。DOX@TT-ABC脂質體在降低的pH和升高的溫度時顯示出顯著增強的細胞攝取、DOX的細胞內積累和細胞毒性。

發(fā)明內容

作為第一方面，本發(fā)明的第一個目的是提供腫瘤觸發(fā)靶向碳酸氫銨脂質體納米材料。它不僅具有血液中的長循環(huán)特性，而且在腫瘤微環(huán)境中能開啟其靶向特性。通過葉酸配體-受體作用，它能進入腫瘤細胞，在升高的溫度或酸性的內體/溶酶體中會產生二氧化碳(CO₂)氣泡。通過產生的CO₂氣泡在磷脂雙分子層中產生可滲透的缺陷，在細胞內快速釋放藥物，消滅腫瘤細胞。

本發(fā)明的第二個目的是提供上述腫瘤觸發(fā)靶向碳酸氫銨脂質體納米材料的制備方法。