[發明專利]一種金水寶片氨基酸的含量測定方法

在審

• 申請號: 201910862114.X
• 申請日: 2019-09-12
• 公開（公告）號: CN112485338A
• 公開（公告）日: 2021-03-12
• 發明（設計）人: 彭常春;李義保;黃小勇;張克勤;李輝虎
• 申請（專利權）人: 江西金水寶制藥有限公司;江西濟民可信藥業有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34
• 代理公司: 北京華科聯合專利事務所(普通合伙) 11130
• 代理人: 孟旭;涂榮昌

本發明涉及一種金水寶片中氨基酸的含量測定方法，所述方法步驟如下：1)供試品溶液的制備：稱取金水寶制劑，將其制成粉末，加濃鹽酸，充入氮氣無氧加熱水解，取出后放至常溫，將水解液用濾紙濾過并用水定容，取定容后的氨基酸水解液，用樣品稀釋液定容，即得供試品溶液；2)對照品溶液的制備：精密稱取各氨基酸對照品適量置同一容量瓶中，加入樣品稀釋液定容即得混合對照品溶液；3)測定，將供試品溶液和對照品溶液分別注入氨基酸自動分析儀，得到色譜圖，根據色譜圖計算每一種氨基酸的含量以及全部氨基酸的含量。

技術領域

本發明涉及一種中藥制劑中的氨基酸含量測定方法，特別涉及一種金水寶片的氨基酸含量測定方法。

技術背景

金水寶制劑為已經上市的產品，包括片劑，膠囊等劑型，其由發酵蟲草菌粉(Cs-4)填充而得，具有補益肺腎，秘精益氣功能。用于肺腎兩虛，精氣不足，久咳虛喘，神疲乏力，不寐健忘，腰膝痠軟，月經不調，陽痿早泄；慢性支氣管炎、慢性腎功能不全、高脂血癥、肝硬化見上述證候者。

“金水寶片質量標準的研究”《中草藥》1999年07期許妍梅玲華公開了用薄層色譜法鑒別金水寶片中氨基酸、甘露醇，用反相高效液相色譜法測定其腺苷含量。

CN201310076926.4公開了一種金水寶制劑中氨基酸的含量測定方法，其采用高效液相色譜法。

現有金水寶制劑的質量標準主要包括核苷類、氨基酸類、甘露醇的薄層色譜鑒別和腺苷含量測定，其中氨基酸類鑒別包括亮氨酸、丙氨酸和纈氨酸的薄層色譜鑒別。研究表明，該制劑中氨基酸類有效成分還包括精氨酸、蘇氨酸、脯氨酸、酪氨酸等，多達十余種，為更好地控制金水寶片的質量，有必要制定一種金水寶片中多種氨基酸成分的含量測定方法。

現有含有氨基酸產品的檢測一般采用，高效液相-柱前衍生法，該方法衍生化條件不易，自動化程度不高，且衍生過過程中所用溶劑為劇毒性，為找到一種，自動化程度更高，衍生化條件更易控制，更安全靈敏度高，專屬性強的檢測方法，本發明通過對色譜條件的選擇，以及對供試品溶液的配制方法的篩選，找到一種同時測定金水寶制劑中多種氨基酸的方法，和氨基酸自動分析儀-柱后衍生法相比，本發明方法精確度高，操作簡單，只在一種色譜條件下即可檢測出多種氨基酸，精密度，穩定性，重復性良好。

發明內容

本發明的目的在于提供一種新的金水寶制劑的質量控制方法。為此，本發明提供一種同時測定金水寶制劑中多種氨基酸的方法。

已知，金水寶制劑含有幾乎全部的人體必須氨基酸，如門冬氨酸、蘇氨酸、絲氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、纈氨酸、甲硫氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、組氨酸、賴氨酸、精氨酸、脯氨酸，為對金水寶制劑的質量進行控制，找到一種一次性測定以上全部氨基酸的方法是本發明的任務，本發明經過篩選研究，找到一種技術解決方案。

為此，本發明提供一種采用氨基酸自動分析儀-柱后衍生法(原理是利用樣品各種氨基酸組分的結構不同、酸堿性、極性及分子大小不同，在陽離子交換柱上將它們分離，采用不同pH值離子濃度的緩沖液將各氨基酸組分依次洗脫下來，再逐個以另一流路的茚酮試劑混合，然后共同流至螺旋反應管中，于一定溫度下進行顯色反應)對金水寶制劑中的氨基酸進行檢測的方法。

本發明所述方法包括以下步驟：

1)供試品溶液的制備：稱取金水寶制劑，將其制成粉末，加濃鹽酸，充入氮氣無氧加熱水解，取出后放至常溫，將水解液用濾紙濾過并用水定容，取定容后的氨基酸水解液，用樣品稀釋液定容，即得供試品溶液；

2)對照品溶液的制備：精密稱取各氨基酸對照品適量置同一容量瓶中，加入樣品稀釋液定容即得混合對照品溶液；

3)測定，將供試品溶液和對照品溶液分別注入氨基酸自動分析儀，得到色譜圖，根據色譜圖計算每一種氨基酸的含量以及全部氨基酸的含量。