[發明專利]一種用于哈維氏弧菌群體感應的抑制肽及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201910862017.0
• 申請日: 2019-09-12
• 公開（公告）號: CN110590918B
• 公開（公告）日: 2022-09-30
• 發明（設計）人: 呂欣然;孫夢桐;白鳳翎;李學鵬;崔天琦;張德福
• 申請（專利權）人: 渤海大學
• 主分類號: C07K14/28
• 分類號: C07K14/28;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/16;A23L33/18;A61K38/16;A61P31/04
• 代理公司: 錦州遼西專利事務所(普通合伙) 21225
• 代理人: 王佳佳

1.一種用于哈維氏弧菌群體感應的抑制肽，其特征是：

氨基酸序列為Ala-Leu-Ser-Leu-Val-Lys-Ile-His-Gly-Arg。

2.一種如權利要求1所述的用于哈維氏弧菌群體感應的抑制肽的制備方法，其特征是：

具體步驟如下：

(1)發酵乳酸乳球菌（Lactococcus lactis）LY3-1，離心、過膜，獲得無細胞上清液，所述乳酸乳球菌LY3-1的保藏號為GDMCC No.60751；

(2)乙酸乙酯萃取無細胞上清液，獲得肽LQLY3-1粗品；

(3)超濾結合凝膠層析法純化肽LQLY3-1粗品，獲得Mr5kDa的肽LQLY3-1精制品；

(4)采用高效液相色譜法，提純肽LQLY3-1精制品，獲得肽LQLY3-1純品。

3.根據權利要求2所述的用于哈維氏弧菌群體感應的抑制肽的制備方法，其特征是：發酵乳酸乳球菌LY3-1時，于MRS液體培養基，37℃發酵，時間為12h。

4.根據權利要求2所述的用于哈維氏弧菌群體感應的抑制肽的制備方法，其特征是：過膜時，用0.45μm濾膜過濾。

5.根據權利要求2所述的用于哈維氏弧菌群體感應的抑制肽的制備方法，其特征是：所述的乙酸乙酯萃取條件包括：V_{無細胞上清液}：V_乙酸乙酯=1:1，時間為10min-15min。

6.根據權利要求2所述的用于哈維氏弧菌群體的感應抑制肽的制備方法，其特征是：

凝膠層析純化條件為：Sephadex G-25凝膠柱，平衡液和洗脫液為20mmol/L、pH6.0磷酸鹽緩沖液，流速為0.5 mL/min，上樣量為2.0mL，280nm處測定其吸光度值。

7.根據權利要求2所述的用于哈維氏弧菌群體感應的抑制肽的制備方法，其特征是：

高效液相色譜提純條件為：C18反相柱，流動相A為0.1%三氟乙酸水溶液，流動相B為0.1%三氟乙酸甲醇溶液，梯度洗脫流動相B，0%平衡4min，0%-100%洗脫21min，100%-100%平衡6min，100%-0%洗脫3min，0%平衡6min，流速為0.8mL/min；進樣量為20μL，紫外檢測波長280nm。

8.一種如權利要求1所述的用于哈維氏弧菌群體感應的抑制肽在制備抑制哈維氏弧菌抗菌藥物中的應用。

9.一種如權利要求1所述的用于哈維氏弧菌群體感應的抑制肽在制備抑制哈維氏弧菌抗菌藥物的中的應用，其特征是：該抑制肽對哈維氏弧菌的最小抑菌濃度為16mg/mL。

10.一種如權利要求1所述的用于哈維氏弧菌群體感應的抑制肽在制備抑制哈維氏弧菌抗菌藥物的中的應用，其特征是：在亞最小抑菌濃度0.08 mg/mL-8 mg/mL范圍內可以抑制哈維氏弧菌的群體感應系統。