[發(fā)明專利]識別豬ROSA26基因的sgRNA及其編碼DNA、基因編輯方法、試劑盒和應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201910856237.2
• 申請日: 2019-09-11
• 公開（公告）號: CN110484538A
• 公開（公告）日: 2019-11-22
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉志國;李奎;牟玉蓮
• 申請（專利權(quán)）人: 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;C12N15/11;C12N15/90;A01K67/027
• 代理公司: 11463 北京超凡宏宇專利代理事務(wù)所(特殊普通合伙)
• 代理人: 李雙艷<國際申請>=<國際公布>=<進入

1.特異性識別豬ROSA26基因的sgRNA，所述sgRNA用于CRISPR/Cpf1系統(tǒng)；所述sgRNA含有如SEQ ID NO.1所示序列，所述SEQ ID NO.1所示序列負責識別靶片段。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的特異性識別豬ROSA26基因的sgRNA，其特征在于，所述sgRNA含有如SEQ ID NO.3所示序列。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的特異性識別豬ROSA26基因的sgRNA，其特征在于，所述豬ROSA26基因的第1內(nèi)含子含有如SEQ ID NO.5所示序列。

4.含有編碼權(quán)利要求1-3任一項所述的sgRNA的序列的DNA分子。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的DNA分子，其特征在于，所述DNA分子含有如SEQ ID NO.2所示序列，所述SEQ ID NO.2編碼所述sgRNA負責識別靶片段的部分。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的DNA分子，其特征在于，所述DNA分子含有如SEQ ID NO.4所示序列，所述SEQ ID NO.4編碼全長所述sgRNA。

7.對豬基因組中ROSA26基因進行基因編輯的方法，其特征在于，所述方法包括將(a)和(b)導(dǎo)入豬源生物材料中，以對豬基因組中ROSA26基因進行編輯；

(a)權(quán)利要求1-3任一項所述的sgRNA或權(quán)利要求4-6任一項所述的DNA分子；

(b)Cpf1分子，所述Cpf1分子包括Cpf1蛋白分子或Cpf1核酸分子。

8.試劑盒，其特征在于，包含權(quán)利要求1-3任一項所述的sgRNA，或權(quán)利要求4-6任一項所述的DNA分子。

9.權(quán)利要求1-3任一項所述的sgRNA、權(quán)利要求4-6任一項所述的DNA分子、權(quán)利要求7所述的方法或權(quán)利要求8所述的試劑盒在對豬進行基因編輯中的應(yīng)用。

10.權(quán)利要求1-3任一項所述的sgRNA、權(quán)利要求4-6任一項所述的DNA分子或權(quán)利要求9所述的試劑盒在制備對豬進行基因編輯的產(chǎn)品中的應(yīng)用。