[發(fā)明專利]一種霍山石斛多糖注射液的制備方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201910837792.0
• 申請日: 2019-09-05
• 公開（公告）號: CN110403906A
• 公開（公告）日: 2019-11-05
• 發(fā)明（設計）人: 徐海軍;爨淑楠;蔣平;劉涵
• 申請（專利權）人: 皖西學院
• 主分類號: A61K9/08
• 分類號: A61K9/08;A61K31/715;A61P39/06;A61P37/04;A61P29/00;C08B37/00
• 代理公司: 合肥正則元起專利代理事務所(普通合伙) 34160
• 代理人: 韓立峰

本發(fā)明公開一種霍山石斛多糖注射液的制備方法，先將霍山石斛提取出霍山石斛多糖，之后將霍山石斛多糖通過鹽酸水解，配制成霍山石斛多糖注射液；霍山石斛多糖注射劑肌注給藥可顯著增加免疫抑制模型小鼠的脾臟指數和胸腺指數；與口服給藥組相比，霍山石斛多糖注射劑肌注給藥組小鼠的胸腺指數顯著高與口服給藥組。說明制備的霍山石斛多糖注射劑可以有效改善免疫抑制小鼠的免疫功能，并且治療效果優(yōu)于口服給藥；解決了目前霍山石斛和其他品種石斛的使用劑型主要為粉劑、口服液、膠囊，尚未見注射劑型，霍山石斛和其他品種石斛多糖目前也沒有注射劑型的技術問題。

技術領域

本發(fā)明屬于注射液技術領域，具體為一種霍山石斛多糖注射液的制備方法。

背景技術

目前霍山石斛和其他品種石斛的使用劑型主要為粉劑、口服液、膠囊，尚未見注射劑型。霍山石斛和其他品種石斛多糖目前也沒有注射劑型。注射劑有一些獨特的優(yōu)點，如作用迅速可靠，不受pH、消化酶、食物等影響，無首過效應，可發(fā)揮全身或局部定位作用，特別適用于不宜口服的藥物和不便口服給藥的寵物及病人(如嚴重嘔吐、口腔或食道手術、處于昏迷狀態(tài)的病人)。霍山石斛多糖具有抗氧化、增強免疫力、抗炎等廣泛的藥理作用，對許多疾病都具有很好的輔助治療作用。

中國發(fā)明專利CN106046194A公開了一種霍山石斛多糖的提取方法，具體的說是利用超聲輔助熱回流提取法對霍山石斛多糖進行提取的方法。所述提取方法提取后的多糖通過苯酚-硫酸法進行檢測其含量。該發(fā)明是將石斛粗粉加乙醚初步除雜后，加甲醇適量，通過超聲輔助熱回流提取后，趁熱過濾，洗滌，將濾渣置于燒瓶中，加水適量，再經超聲輔助熱回流提取，趁熱過濾，重復操作4次，將得到的濾液及洗液合并，經過旋轉蒸發(fā)，得到目標產物霍山石斛多糖。

發(fā)明內容

為了克服上述的技術問題，本發(fā)明提供一種霍山石斛多糖注射液的制備方法。

本發(fā)明所要解決的技術問題：

目前霍山石斛和其他品種石斛的使用劑型主要為粉劑、口服液、膠囊，尚未見注射劑型，霍山石斛和其他品種石斛多糖目前也沒有注射劑型。

本發(fā)明的目的可以通過以下技術方案實現：

一種霍山石斛多糖注射液的制備方法,包括如下步驟：

步驟S1、(a)將霍山石斛剪成條狀，粉碎成粉末，稱取粉末15-25g，加入到1L的圓底燒瓶中，加入350-500mL的蒸餾水，放入96℃水浴鍋中，攪拌并加熱煎煮2h；(b)2h后，倒入離心管離心，控制離心速度為3000rpm，離心時間為4min，收集上清液和沉淀，向沉淀加入450-500mL的蒸餾水，繼續(xù)煎煮2h，2小時后以3000rpm的轉速離心3min，收集上清液和沉淀，向沉淀里面加入450-500mL的蒸餾水，煎煮2h，2h后以3000rpm的轉速離心3min，收集上清液；(c)合并b中收集的上清液；(d)將合并后的上清液用旋轉蒸發(fā)儀濃縮至300-400mL，并加入sevage試劑，搖勻，以8000rpm離心1min，收集上清液，然后用sevage法再重復2次；(e)收集上清液，加入95％的乙醇1.5-2L，沉淀，用4層紗布過濾，用95％的乙醇洗滌2次，之后用丙酮洗滌3次，透析，用旋轉蒸發(fā)儀在真空度-0.06-0.08MPa、80℃的條件下濃縮至相對密度為1.10-1.30的濃縮液，之后真空冷凍干燥4h，制得霍山石斛多糖；

步驟S2、將霍山石多糖在pH＝1的鹽酸溶液中水解1h，加入氫氧化鈉調節(jié)pH至中性，透析，用旋轉蒸發(fā)儀真空度-0.06-0.08MPa、80℃的條件下濃縮至相對密度為1.10-1.30的濃縮液，之后真空冷凍干燥4h，制得經鹽酸水解后的霍山石斛多糖；

步驟S3、將鹽酸水解后的霍山石斛多糖，配制成濃度8-10mg/mL，過濾、裝于安瓿中，每支安瓿裝10mL，121℃加熱30min，冷卻、檢測，檢測合格后制得霍山石斛多糖注射液。

步驟S1中sevage試劑與合并后的上清液的體積比為1∶3。