[發(fā)明專利]一種誘導(dǎo)化橘紅愈傷組織出芽的方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201910830033.1 | 申請日： | 2019-09-02 |
| 公開（公告）號： | CN110521596B | 公開（公告）日： | 2023-03-31 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 黃新敏;韓寒冰;歐陽樂軍;李小雙;林玨;彭召敏 | 申請（專利權(quán)）人： | 廣東石油化工學(xué)院 |
| 主分類號： | A01H4/00 | 分類號： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 深圳市鼎泰正和知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 44555 | 代理人： | 繆太清 |
| 地址： | 525000 廣東省*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 誘導(dǎo) 橘紅 組織 出芽 方法 | ||
1.一種化橘紅愈傷組織誘導(dǎo)出芽的方法，它包括以下步驟：外植體選取以及滅菌、愈傷組織形成、繼代培養(yǎng)、誘導(dǎo)愈傷組織出芽和芽形成后的生根誘導(dǎo)、煉苗和移栽；
其中愈傷組織形成步驟采用愈傷組織形成培養(yǎng)基；
愈傷組織形成培養(yǎng)基的配制：MS+芐基腺嘌呤（6-BA) 0.8-1.2mg/L+萘乙酸（NAA）0.03-0.06 mg/L +維生素C 100~120 mg/L+蔗糖50g/L +土豆100g/L +瓊脂7g/L，培養(yǎng)基pH 值為5.8；
其中誘導(dǎo)愈傷組織出芽步驟采用誘導(dǎo)培養(yǎng)基；
誘導(dǎo)培養(yǎng)基的配制：MS+芐基腺嘌呤（6-BA) 0.8-1.2 mg/L+萘乙酸（NAA）0.03-0.06mg/L +維生素C 100~120 mg/L+乙酰丁香酮0. 196mg/L+海藻糖15g/L +化橘紅葉提取液0.2mg/L +土豆100g/L +瓊脂7g/L，培養(yǎng)基pH 值為5.8；
其中化橘紅提取液制備方法：
取新鮮化橘紅葉置110℃烘箱中殺青，再置60℃中烘至恒重，經(jīng)粉碎和過40目篩得到小于40目的粉末作提取用；分別取5 g葉樣品粉末，置于250 mL提取管中，加入60%乙醇溶液250 mL，充分搖勻，采用超聲儀在40~50℃超聲20~30 min，提取2次；合并所有提取液并冷凍干燥，用超純水進(jìn)行溶解并置4℃?zhèn)溆茫?/p>
所述愈傷組織形成步驟中，在溫度為26±2℃的條件下暗培養(yǎng)15~20天；所述誘導(dǎo)愈傷組織出芽步驟中，在光照強(qiáng)度為2300-2400lx，16h/8h光暗條件下，溫度為26±2℃的條件下培養(yǎng)25~35天；以化橘紅當(dāng)年生半木質(zhì)化莖段用滅菌手術(shù)刀斜切1.5-2.0cm的腋芽作為外植體；所述愈傷組織形成培養(yǎng)基的配制流程為：將MS+芐基腺嘌呤（6-BA) 0.8-1.2mg/L+萘乙酸（NAA）0.03-0.06 mg/L +維生素C 100~120 mg/L+蔗糖50g/L +土豆100g/L +瓊脂7g/L配制成工作液，將工作液按照每個錐形瓶50mL分裝，分裝后通過吸塵器對每個錐形瓶進(jìn)行抽氣，然后將錐形瓶密封并放入消毒鍋高壓消毒。
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