[發(fā)明專利]一種食用油中4種多環(huán)芳烴化合物的快速提取凈化方法及其檢測應用

有效

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• 申請日: 2019-09-02
• 公開（公告）號: CN110609096B
• 公開（公告）日: 2022-03-11
• 發(fā)明（設計）人: 章再婷;楊亮;李雙;劉忠義;陳樹兵
• 申請（專利權）人: 寧波中盛產(chǎn)品檢測有限公司;寧波海關技術中心
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 寧波奧圣專利代理有限公司 33226
• 代理人: 何仲

本發(fā)明公開了一種食用油中4種多環(huán)芳烴化合物的快速提取凈化方法及其檢測應用，特點是包括以下步驟：（1）稱取待測食用油樣品，依次加入提取液和脂肪酶，恒溫震蕩酶解后，加入碳酸鉀和乙醇或碳酸鈉和乙醇，渦旋混勻；（2）然后加入正己烷和水，震蕩離心后，分離得到上層有機相和下層水相；（3）取下層水相按步驟（2）方法，重復萃取1次；合并兩次萃取所得上層有機相部分，混勻，40℃旋蒸至干，用乙腈復溶，過濾膜待分析；其檢測應用為按上述方法進行樣品前處理，然后進行液相色譜?熒光檢測，根據(jù)4種PAHs的濃度與儀器響應值之間的定量關系，計算獲得待測液中4種PAHs含量；優(yōu)點是提取回收率高，簡單快速、靈敏度和準確性高。

技術領域

本發(fā)明涉及一種食用油中4種多環(huán)芳烴的前處理以及檢測方法，尤其是涉及一種食用油中4種多環(huán)芳烴化合物的快速提取凈化方法及其檢測應用。

背景技術

多環(huán)芳烴(polycyclic aromatic hydrocarbons，PAHs)作為一類強致癌性化合物，主要來源于反復使用或高溫油炸的食用油中，苯并[a]蒽(BaA)、苯并[b]熒蒽(BbF)、苯并[k]熒蒽(BkF)和苯并[a]芘(BaP)是毒性較強的4種PAHs，其中BaP被國際癌癥研究機構歸為1類致癌物，其余三種歸為2B類致癌物。受暴利的驅使，非正常食用油越來越頻繁的出現(xiàn)在人們的生活中，對人們的身體健康存著巨大的威脅，國家嚴厲打擊此類食品違法行為。因此，建立能夠快速同時測定食用油中4種PAHs含量的方法尤為重要。

盡管已有學者建立了食用油中單一或多個多環(huán)芳烴的快速篩查方法，但前處理過程復雜，且成本較高，不能滿足市場快速、環(huán)保的檢測需求。現(xiàn)有的前處理技術主要包括：基質分散萃取技術(QuEChERS等)，固相萃取技術(HLB小柱，中性氧化鋁柱等)和凝膠滲透色譜法(GPC)等。其中固相萃取柱通過氫鍵相互作用而保留在吸附劑上，雖能有效除去油脂基質，但操作過程繁瑣耗時，且重現(xiàn)性差；GPC方法雖具備自動化優(yōu)勢，但單樣需耗時3小時凈化完成，需要消耗大量有機溶劑，實驗成本高。例如，吳春英等建立了餐廚廢棄中苯并(a)芘的Oasis HLB小柱凈化方法，為避免油脂洗脫，采用中等極性的乙腈作為淋洗液；同樣的，王溪等采用QuEChERS/凈化技術對枸杞籽油中多環(huán)芳烴類物質進行提取凈化，乙腈作為提取液，對含有多個環(huán)狀結構的親脂性化合物不能保證高回收率。王磊等建立了花生油中苯并芘的凝膠色譜凈化方法，經(jīng)凝膠滲透色譜裝置凈化后聯(lián)合了氧化鋁填充柱除油，最大限度的降低了油脂基質干擾，且很好的保證了高回收率(95％)，但此方法有機溶劑消耗巨大，GPC凈化過程繁瑣耗時，隨著樣品檢測量逐年攀升，大大限制了此方法在日常檢查中的應用。如何把親脂性化合物從油脂中有效提取出來，這始終是一個艱巨的挑戰(zhàn)。因此，建立研究各類食用油中4種PAHs快速篩查技術對于提高監(jiān)管工作效率，保障我國人民的食品安全具有非常重要的意義。

發(fā)明內容

本發(fā)明所要解決的技術問題是提供一種提取回收率高的食用油中4種多環(huán)芳烴化合物的快速提取凈化方法及其檢測應用，該檢測方法操作簡單快速、靈敏度和準確性高。

本發(fā)明解決上述技術問題所采用的技術方案為：

1、一種食用油中4種多環(huán)芳烴化合物的快速提取凈化方法，包括以下步驟：

(1)稱取待測食用油樣品，依次加入提取液和脂肪酶，于37±2℃恒溫震蕩酶解1.5-2.5h后，加入碳酸鉀和乙醇，或碳酸鈉和乙醇，渦旋混勻；

(2)然后加入正己烷和水，震蕩4-6min，以4000-5000r/min離心4-6min，分離得到上層有機相和下層水相；

(3)取下層水相按步驟(2)方法，重復萃取1次；合并兩次萃取所得上層有機相部分，混勻，40℃旋蒸至干，用乙腈復溶，過濾膜，得到含有苯并蒽、苯并熒蒽、苯并熒蒽和苯并芘4種多環(huán)芳烴化合物的待測樣品。

所述的提取液的配制方法如下：將磷酸二氫鉀溶于水中配制成濃度為0.108kg/L的磷酸二氫鉀溶液，用氫氧化鉀調pH至8.0。