[發明專利]用于檢測小鼠腺病毒K87株的PCR引物、PCR方法及試劑盒有效
| 申請號： | 201910814534.0 | 申請日： | 2019-08-30 |
| 公開（公告）號： | CN110358868B | 公開（公告）日： | 2022-08-09 |
| 發明（設計）人： | 王立鵬;朱明星;時長軍 | 申請（專利權）人： | 蘇州西山生物技術有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/70 | 分類號： | C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11 |
| 代理公司： | 廣州市紅荔專利代理有限公司 44214 | 代理人： | 胡昌國 |
| 地址： | 215123 江蘇省蘇州市工業*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 用于 檢測 小鼠 病毒 k87 pcr 引物 方法 試劑盒 | ||
1.一種用于檢測小鼠腺病毒K87株的PCR引物，其特征在于，所述引物包括上游引物和下游引物，所述上游引物的核苷酸序列為SEQ ID NO.1所示序列，所述下游引物的核苷酸序列為SEQ ID NO.2所示序列。
2.根據權利要求1所述的PCR引物，其特征在于，所述引物是根據小鼠腺病毒K87株六鄰體蛋白基因，通過引物設計軟件設計獲得的。
3.一種用于檢測小鼠腺病毒K87株的PCR方法，其特征在于，所述PCR方法至少包括提供SEQ ID NO.1所示上游引物和SEQ ID NO.2所示的下游引物；
所述PCR方法包括以下步驟：
S1、DNA提取：取待測樣品提取其中的病毒DNA，保存備用；
S2、提供引物：所述上游引物和下游引物是根據小鼠腺病毒K87株六鄰體蛋白基因，通過引物設計軟件設計獲得一對引物；
S3、建立PCR反應體系：所述反應體系至少包括2×Premix Ex Taq、ROX染料、所述上游引物、所述下游引物、分子級水、所提取的DNA模板；
S4、設置PCR儀擴增反應中的參數：在熒光定量PCR反應系統中設置95℃預變性30s，95℃變性5s，60℃退火延伸34s，進行40個循環；以及
S5、采集信號，收集溶解曲線步驟；
以所提取的DNA為模板，通過所述引物擴增，獲得擴增片段為188bp。
4.根據權利要求3所述的PCR方法，其特征在于，所述PCR方法中不包括探針設計。
5.根據權利要求3所述的PCR方法，其特征在于，所述PCR方法中Tm值為87.0℃±0.5℃，并且溶解峰單一。
6.根據權利要求3所述的PCR方法，其特征在于，所述PCR方法能夠檢測最低檢測下限為24copies/reaction。
7.一種用于檢測小鼠腺病毒K87株的試劑盒，所述試劑盒至少提供一對上游引物和下游引物，所述上游引物的核苷酸序列為SEQ ID NO.1所示序列，所述下游引物的核苷酸序列為SEQ ID NO.2所示序列。
8.根據權利要求7所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還提供2×Premix Ex Taq、ROX染料。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于蘇州西山生物技術有限公司，未經蘇州西山生物技術有限公司許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作，請聯系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201910814534.0/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
