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[發(fā)明專利]一種創(chuàng)制高香型矮牽牛新種質(zhì)的分子方法有效

專利信息
申請?zhí)枺?/td> 201910811769.4 申請日: 2019-08-30
公開(公告)號: CN110452918B 公開(公告)日: 2021-03-09
發(fā)明(設(shè)計(jì))人: 袁媛;何弦;張?jiān)?/a>;伍炳華 申請(專利權(quán))人: 福建農(nóng)林大學(xué)
主分類號: C12N15/60 分類號: C12N15/60;C12N15/82;C12N15/66;A01H5/02;A01H6/82
代理公司: 福州元?jiǎng)?chuàng)專利商標(biāo)代理有限公司 35100 代理人: 饒文君;蔡學(xué)俊
地址: 350002 福*** 國省代碼: 福建;35
權(quán)利要求書: 查看更多 說明書: 查看更多
摘要:
搜索關(guān)鍵詞: 一種 創(chuàng)制 香型 牽牛 種質(zhì) 分子 方法
【權(quán)利要求書】:

1.一種茉莉花香氣合成關(guān)鍵酶基因JsTPS4,其特征在于,所述基因的核苷酸序列為SEQID NO:1。

2.含有權(quán)利要求1所述的茉莉花香氣合成關(guān)鍵酶基因JsTPS4的重組表達(dá)載體pK7FWG2.0- proCbLIS:JsTPS4

所述的重組表達(dá)載體pK7FWG2.0- proCbLIS:JsTPS4的構(gòu)建方法,包括以下步驟:

(1)合成花特異性啟動子proCbLIS序列,proCbLIS序列見GeneBank 登錄號AF067601.1;

(2)構(gòu)建pK7FWG2.0- proCbLIS空載體:采用酶切連接的方法,將花特異性啟動子proCbLIS通過單向限制性內(nèi)切酶位點(diǎn)Spe I和Sac I置換掉表達(dá)載體pK7FWG2.0的CaMV35S啟動子,獲得重構(gòu)的pK7FWG2.0-proCbLIS表達(dá)載體;

(3)擴(kuò)增茉莉花香氣合成關(guān)鍵酶基因JsTPS4編碼序列:采用TransZol Up Plus RnaKit提取提取茉莉花花瓣總RNA,使用SMARTerTMRACE cDNA Amplification Kit擴(kuò)增得到JsTPS4的5’和3’cDNA序列,拼接后獲得cDNA全長并獲得JsTPS4編碼序列;

(4)將JsTPS4編碼序列克隆入pENTR/D-TOPO載體獲得TOPO- JsTPS4中間載體,再利用LR酶將TOPO- JsTPS4中載體與pK7FWG2.0-proCbLIS載體進(jìn)行置換反應(yīng),使JsTPS4序列置換入proCbLIS啟動子之下,獲得pK7FWG2.0- proCbLIS:JsTPS4表達(dá)載體。

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說明:

1、專利原文基于中國國家知識產(chǎn)權(quán)局專利說明書;

2、支持發(fā)明專利 、實(shí)用新型專利、外觀設(shè)計(jì)專利(升級中);

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