[發明專利]一種大豆疫霉抑制劑及其制備方法

有效

• 申請號: 201910806605.2
• 申請日: 2019-08-29
• 公開（公告）號: CN110622968B
• 公開（公告）日: 2021-03-19
• 發明（設計）人: 劉冬;潘月敏;周多奇;吳彥;呂新霞
• 申請（專利權）人: 劉冬
• 主分類號: A01N37/40
• 分類號: A01N37/40;C07C67/48;C07C69/84;C12P7/62;A01P3/00
• 代理公司: 合肥律通專利代理事務所(普通合伙) 34140
• 代理人: 鄭松林

本發明提供一種大豆疫霉抑制劑及其制備方法，涉及植物病害生物防治領域，包括沒食子酸丙酯，所述沒食子酸丙酯作為食品添加劑主要用于食品的抗氧化作用，對大豆疫霉的值EC_50％僅為0.458mmol/L，即抑制率為50％時，沒食子酸丙酯的濃度僅為0.458mmol/L，安全性較高。其抑制大豆疫霉危害主要來自兩方面其一沒食子酸丙酯抑制大豆疫霉的生長，其作用機理及靶位點，通過蛋白組學技術揭示大豆疫霉的抑制機理與脂肪轉運與代謝、能量代謝和碳水化合物代謝等關鍵通路蛋白表達的大幅下調緊密相關；其二沒食子酸丙酯可以激發植物的防衛反應，提高抗性基因表達量抵抗大豆疫霉的侵染。

技術領域

本發明涉及植物病害生物防治領域，尤其涉及一種大豆疫霉抑制劑及其制備方法。

背景技術

本發明涉及植物病害生物防治領域，尤其涉及一種大豆疫霉抑制劑及其制備方法。

背景技術

大豆疫霉病菌引起的大豆疫病是大豆生產中的毀滅性病害之一,是我國對外公布的一類植物檢疫危險性病原真菌。該病菌以土壤傳播為主，大豆疫霉病原真菌是典型的土壤習居菌，主要以抗逆性很強的卵孢子在土壤中和土壤中的寄主殘體內越冬并長期生存。當田間溫度和濕度適宜時,卵孢子打破休眠萌發產生孢子囊,雨后有積水時，孢子囊很快釋放出大量游動孢子,游動孢子被雨水沖濺到寄土表面.或受寄主分泌物的吸引。朝根系游動并最終侵染寄主。目前的防治大豆疫霉的方法有如下幾種：(1)選用對當地小種具抵抗力的抗病品種。(2)加強田間管理，及時深耕及中耕培土。雨后及時排除積水防止濕氣滯留。(3)播種時溝施甲霜靈顆粒劑，使大豆根吸收防止根部侵染。(4)播種前種子重量0.3％的35％甲霜靈粉劑拌種。(5)必要時噴灑或澆灌25％甲霜靈可濕性粉劑800倍液、58％甲霜靈錳鋅可濕性粉劑600倍液或64％殺毒礬可濕性粉劑900倍液。可知在大豆疫霉防治中甲霜靈或殺毒礬抑制大豆疫霉的生長作為主要防治手段，其作用機制為抑制RNA聚合酶從而抑制了RNA的生物合成。

而農藥使用不當可對植物產生藥害，引起人畜中毒，殺傷有益微生物，導致病原物產生抗藥性，農藥的高殘留還可造成環境污染。

發明內容

本發明的目的在于提供一種大豆疫霉抑制劑及其制備方法，以解決上述技術問題。

本發明為解決上述技術問題，采用以下技術方案來實現：一種大豆疫霉抑制劑，包括沒食子酸丙酯和癸醇，癸醇作為沒食子酸丙酯的助溶劑，其用量比例為：0.1mg-0.3mg的癸醇：1-2mmol的沒食子酸丙酯。

所述沒食子酸丙酯采用超臨界二氧化碳萃取方法，包括如下步驟：

(1)精確稱取顆粒大小在2-5mm大小的赤芍粉1.3-1.8kg，將其加入17-22％的溫度為6-8℃的純水中，在5℃條件下放置50-70分鐘，超臨界二氧化碳萃取中，超臨界二氧化碳提取壓力為33-37MPa，提取時間為54-57分鐘，二氧化碳流率為4.5-5.7L/min，即可提取出沒食子酸丙酯粗提物；

(2)沒食子酸丙酯純化：將(3)中沒食子酸丙酯粗提物按照1:5的質量比溶于85-90℃的熱水中，用截留分子量10kDa的超濾膜超濾去大分子雜質；然后用旋轉蒸發儀中濃縮至沒食子酸丙酯含量大于20-50mg/L；

(3)結晶純化與干燥：將(4)中的沒食子酸丙酯轉移到50ml的離心管中，4-6℃下放置12小時后有沉淀出現在離心管底部，在10000rpm/min下離心5分鐘，去上清，液氮速凍沉淀后，在-60℃、真空度為45的真空條件下冷凍干燥，待干燥至粉末，即獲得沒食子酸丙酯。

所述沒食子酸丙酯還可由沒食子酸和丙醇在單寧酶的催化下制備，包括如下制備步驟：