[發明專利]用于檢測人SLCO1B1和ApoE基因分型的引物探針組合物、試劑盒及檢測方法

在審

• 申請號: 201910805489.2
• 申請日: 2019-08-29
• 公開（公告）號: CN110387407A
• 公開（公告）日: 2019-10-29
• 發明（設計）人: 盛青松;姚魯帥
• 申請（專利權）人: 無錫市申瑞生物制品有限公司
• 主分類號: C12Q1/6858
• 分類號: C12Q1/6858;C12N15/11
• 代理公司: 蘇州友佳知識產權代理事務所(普通合伙) 32351
• 代理人: 儲振

本發明提供了一種用于檢測人ApoE和SLCO1B1基因分型的引物探針組合物、試劑盒及檢測方法，該引物探針組合物包括ApoE和SLCO1B1基因分型的特異性引物和特異性探針及內參試劑。通過本發明所揭示的引物探針組合物、試劑盒及檢測方法，實現了同時對人血液DNA樣本中的SLCO1B與ApoE中的四個基因分型SLCO1B1*1b(388G?521T)、SLCO1B1*5(388A?521C)、ApoE?E4(388C?526C)、ApoE?E2(388T?526T)基因分型的多態性檢測，并具有高靈敏度、高特異性、低成本高通量、操作簡便、實驗周期短等優點，具有基因檢測成本較低的技術優勢。

技術領域

本發明涉及基因檢測技術領域，尤其涉及一種用于檢測人SLCO1B1和ApoE基因分型的引物探針組合物、試劑盒及檢測方法。

背景技術

他汀類藥物是當今世界應用最為廣泛的降脂藥物之一，通過有效降低血脂、穩定血管內斑塊，對抑制心腦血管疾病的發生有顯著作用。隨著他汀類藥物的廣泛使用，研究者發現不同個體對不同他汀類藥物的反應存在嚴重的差異，而導致差異的關鍵因素是他汀類藥物在肝臟代謝和轉運的遺傳特性不同，主要由陰離子轉運多肽(OATP1BI)由SLCOIBI基因編碼以及載脂蛋白E(ApoE)的基因多態性決定。

陰離子轉運多肽(OATP1BI)是一種重要的肝特異性轉運體，由SLCO1B1基因編碼。SLCO1B1基因突變引起編碼的有機陰離子轉運多肽活力減弱，表現為肝臟攝取藥物能力降低，引起他汀類藥物血藥濃度上升，增加橫紋肌溶解癥或肌病的發生風險。因此，通過檢測SLCO1B1基因*1B及*5(388A>G、521T>C)位點，可準確評估他汀類藥物的毒性反應及療效情況，為臨床合理、安全使用他汀提供科學依據，實現患者個體化及有針對性的用藥。

載脂蛋白E(Apolipoprotein E，ApoE)在脂質代謝中發揮重要作用。編碼APOE的基因有3個等位基因，分別為E2、E3和E4。其中E3型為野生型ApoE，占人類的78％，屬于常見基因型；E2型ApoE個體冠心病的風險降低而易患黃斑變性及Ⅲ類高脂血癥；E4型ApoE個體增加老年癡呆癥、冠心病、腦梗塞、視網膜色素變性等疾病風險。他汀類藥物對E4型ApoE個體的療效往往不佳，而對E2型ApoE攜帶者的降脂作用最強。因此，建議對正在或者考慮接受他汀降脂藥物治療的患者，進行SLCOIBI基因和ApoE基因的基因分型進行多態性檢測，從而有效預估他汀的肌病發生情況及降脂治療的效果，為合理選擇他汀起始用量提供科學依據，以提高他汀用藥的安全性。

目前，現有的對人SLCO1B1和ApoE基因分型檢測方法包括：直接測序法、芯片雜交法及高分辨率溶解曲線法。直接測序法雖然靈敏度高，但是價格昂貴，工序繁瑣，難以滿足臨床檢測要求；芯片雜交法，檢測靈敏度低并且特異性差，容易出現假陽性結果；高分辨率溶解曲線法對設備要求特殊，不適合臨床推廣，且檢測靈敏度不高。

有鑒于此，有必要對現有技術中的人SLCO1B1和ApoE基因分型檢測方法及相關技術予以改進，以解決上述問題。

發明內容

本發明的目的在于揭示一種用于檢測人SLCO1B1和ApoE基因分型的引物探針組合物、試劑盒及檢測方法，用以實現同時對人SLCO1B1*1b(388G-521T)、SLCO1B1*5(388A-521C)、ApoE-E4(388C-526C)、ApoE-E2(388T-526T)基因分型的多態性檢測，以實現高靈敏度、高特異性、低成本高通量、操作簡便、實驗周期短等特點。

為實現上述第一個目的，本發明提供了一種用于檢測人ApoE和SLCO1B1基因分型的引物探針組合物，包括：用于檢測待檢樣品中ApoE和SLCO1B1基因分型的特異性引物和特異性探針，內參試劑；