[發(fā)明專利]一種具有乳化活性與抗氧化活性的鳶烏賊蛋白肽及其制備方法與應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201910798736.0
• 申請日: 2019-08-27
• 公開（公告）號: CN110452286B
• 公開（公告）日: 2023-07-11
• 發(fā)明（設計）人: 胡曉;楊賢慶;李來好;陳勝軍;吳燕燕;馬海霞;鄧建朝;楊少玲
• 申請（專利權）人: 中國水產科學研究院南海水產研究所
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/16;C12N15/12;C12P21/06;A23C13/12
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 江裕強

本發(fā)明公開了一種具有乳化活性與抗氧化活性的鳶烏賊蛋白肽及其制備方法與應用。該方法包括：提取鳶烏賊蛋白，然后對鳶烏賊蛋白預處理及控制酶解，鳶烏賊蛋白肽的分離富集，鳶烏賊蛋白肽的限制性酶法交聯，得到所述具有乳化活性與抗氧化活性的鳶烏賊蛋白肽。本發(fā)明提供的制備方法，采用生物酶法等技術，以鳶烏賊為原料，制備出兼具乳化活性與抗氧化活性的蛋白肽。本發(fā)明提供的具有乳化活性與抗氧化活性的鳶烏賊蛋白肽的制備方法，具有工藝簡便、產品安全及可應用于實際生產等優(yōu)點。

技術領域

本發(fā)明屬于水產功能性肽技術領域，具體涉及一種具有乳化活性與抗氧化活性的鳶烏賊蛋白肽及其制備方法與應用。

背景技術

隨著人們生活水平的提高，對具有維持機體健康，預防疾病發(fā)生的抗氧化產品的需求越來越大。以食物蛋白源為原料，采用生物酶解法制備的抗氧化肽由于具有天然、安全、無毒副作用的特點，越來越受到人們的青睞。鳶烏賊是一種高蛋白低脂肪海洋生物，具有較高的營養(yǎng)價值。我國南海鳶烏賊的生物量巨大，年捕撈量可達到兩百萬噸，資源極為豐富，但由于其肉質較硬，不符合大眾消費口味，從而導致該蛋白資源目前未得到充分開發(fā)與利用，其精深加工水平與高值化利用程度較低。前期研究發(fā)現，鳶烏賊蛋白酶解產物具有較好的抗氧化性，但由于高活性抗氧化肽通常具有分子量小、肽鏈短、線性結構等特點，難以在油/水界面形成穩(wěn)定的吸附膜，因此其乳化等功能特性較差，難以應用到乳液、奶油等產品中。因此，采用生物酶法等技術，以海洋中資源極為豐富的鳶烏賊為原料，制備兼具乳化活性與抗氧化活性的蛋白肽將具有廣泛的應用前景。

發(fā)明內容

為了克服現有技術存在的上述不足，本發(fā)明的目的是提供一種具有乳化活性與抗氧化活性的鳶烏賊蛋白肽及其制備方法與應用。

本發(fā)明的目的至少通過如下技術方案之一實現。

本發(fā)明提供的一種具有乳化活性與抗氧化活性的鳶烏賊蛋白肽，其氨基酸序列如SEQ?ID?NO.1所示。

本發(fā)明提供的一種具有乳化活性與抗氧化活性的鳶烏賊蛋白肽的編碼基因，其核苷酸序列如SEQ?ID?NO.2所示。

本發(fā)明公開了以鳶烏賊為原料，制備一種具有乳化活性與抗氧化活性的鳶烏賊蛋白肽的方法，包括以下步驟:(1)鳶烏賊蛋白提??；(2)鳶烏賊蛋白預處理及控制酶解；(3)鳶烏賊蛋白肽的分離富集；(4)鳶烏賊蛋白肽的限制性酶法交聯；采用本發(fā)明方法制備的鳶烏賊蛋白肽兼具較好的乳化活性與抗氧化活性，此外，本發(fā)明中公開的上述鳶烏賊蛋白肽的制備方法，工藝較為簡單，產品安全，可應用于實際生產中。

本發(fā)明提供的一種制備上述的具有乳化活性與抗氧化活性的鳶烏賊蛋白肽的方法，包括如下步驟：

(1)鳶烏賊蛋白提取

將鳶烏賊去除頭、內臟后洗凈、瀝干，用絞肉機絞成肉糜，將肉糜加入水中，混合均勻，得到肉糜液，調節(jié)肉糜液的pH為堿性(優(yōu)選用0.1-1mol/L?NaOH溶液調節(jié))，攪拌處理(常溫)，離心取上清液，將上清液的pH調節(jié)為酸性(可以用0.1-1mol/L?HCl溶液調節(jié))，離心取沉淀，加水，混合均勻得到混合液，調節(jié)混合液的pH值為中性(可以用0.1-1mol/L?NaOH溶液調節(jié))，去離子水進行透析至透析液中檢測不出鹽離子，濃縮，干燥得到鳶烏賊蛋白；

(2)鳶烏賊蛋白預處理及控制酶解

將步驟(1)所述鳶烏賊蛋白加入水中，高壓均質處理，混合均勻得到鳶烏賊蛋白的水溶液，調節(jié)鳶烏賊蛋白的水溶液pH值為6.5-8.0，升溫，加入蛋白酶進行酶解反應，然后進行滅酶處理，離心取上清液，得到酶解液；

(3)鳶烏賊蛋白肽的分離富集

將步驟(2)所述酶解液通過超濾膜，取濾過液；將所述濾過液通過葡聚糖凝膠層析柱，用洗脫液洗脫，收集分子量為300Da-900Da的組分，濃縮，干燥，得到純化后的蛋白肽；

(4)鳶烏賊蛋白肽的限制性酶法交聯