[發明專利]一種野馬追的質量檢測方法

有效

• 申請號: 201910798452.1
• 申請日: 2019-08-27
• 公開（公告）號: CN110554108B
• 公開（公告）日: 2020-07-24
• 發明（設計）人: 王超
• 申請（專利權）人: 南京市中西醫結合醫院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/72
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 曹佩佩

1.一種野馬追的質量檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)供試品溶液的制備

精密稱取野馬追20g，加入乙醇100ml提取，采用超聲法、回流提取法和連續回流提取法進行提取1~3次，每次0.5~2小時，合并提取液，過濾，取續濾液過0.22 μm濾膜，得供試品溶液；

(2)混合對照品溶液的制備

精密稱定野馬追內酯A、野馬追內酯B、野馬追內酯F、野馬追內酯K、野馬追內酯H、蘆丁、槲皮素、山柰酚、金絲桃苷、異鼠李素、木犀草素、蒲公英甾醇乙酸酯、偽蒲公英甾醇乙酸酯、偽蒲公英甾醇、東莨菪內酯、6,7-二甲氧基香豆素，綠原酸、新綠原酸、隱綠原酸、澤蘭葉黃素、異澤蘭黃素對照品置于量瓶中，用甲醇溶解稀釋，分別制備得到每1ml含42.5μg、38.7μg、44.7μg、46.9μg、31.5μg、32.5μg、22.5μg、31.5μg、41.2μg、39.5μg、44.5μg、41.5μg、24.5μg、25.5μg、38.5μg、44.5μg、26.5μg、32.5μg、40.5μg、35.3μg和26.5μg的混合對照品溶液于4℃保存，備用；

(3)線性回歸方程的建立

取步驟（2）的混合對照品溶液依次稀釋1、2、3、4和5倍，得到系列濃度的混合對照品溶液，依次注入超高效液相色譜-質譜儀，以系列對照品濃度作為橫坐標X，對應的峰面積為縱坐標Y，對各化學成分進行線性回歸分析，并計算線性回歸方程；

（4）含量測定

取步驟（1）的野馬追供試品溶液注入超高效液相色譜-質譜儀進行分析，將峰面積代入步驟（3）的線性回歸方程，計算供試品溶液中21種成分的含量；

步驟（3）和步驟（4）的色譜條件為：

色譜柱為：Acquity UPLC BEH C₁₈，規格2.1 mm×100 mm, 1.7μm；流動相：0.1%冰醋酸水溶液為A相，乙腈為B相，梯度洗脫；流速：0.6~0.8mL/min；進樣量：2 μL；柱溫35℃；梯度洗脫方式為：

0–2.0 min，5→10% B；2.0–6.0 min，10→55% B；6.0–7.0min，55→90% B；7.0–9.0min，90→50% B；9–10.0 min，50→20% B，10–12.0 min，20→5% B；

其中，離子化模式采用ESI⁺/ESI^-；檢測方式為多反應檢測模式；脫溶劑氣溫度：550℃；離子源溫度：155℃；毛細管電壓：5.0 kV；碰撞氣流量0.2 mL·min^-1；脫溶劑氣流量900 L·h^-1；錐孔氣流量：50 L·h^-1。