[發明專利]一種野馬追的質量檢測方法

有效

• 申請號: 201910798452.1
• 申請日: 2019-08-27
• 公開（公告）號: CN110554108B
• 公開（公告）日: 2020-07-24
• 發明（設計）人: 王超
• 申請（專利權）人: 南京市中西醫結合醫院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/72
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 曹佩佩

本發明公開了一種野馬追的質量檢測方法，該方法包括供試品溶液的制備、混合對照品的制備、線性回歸方程的建立和含量測定。本發明通過大量實驗篩選，采用超高效液相色譜檢測，該檢測方法可以同時檢測野馬追中的黃酮、萜內酯、酚酸、生物堿、香豆素5類成分，共21種不同的活性化合物。該方法檢測靈敏度高，穩定性好，可以客觀、全面、準確地評價野馬追藥材的質量，對控制其質量和保證療效具有重要意義。

技術領域

本發明涉及一種中藥材的質量檢測方法，具體涉及野馬追的質量檢測方法。

背景技術

野馬追為菊科植物輪葉澤蘭(Eupatorium lindleyanum DC.)的干燥地上部分，又名白鼓釘、化食草、毛澤蘭。具有清熱解毒、祛痰定喘、降血壓、利尿消腫等功效，主要用于治療慢性氣管炎、支氣管炎、高血壓病，由其制成的野馬追糖漿在臨床上應用廣泛，對一般咳嗽、慢性氣管炎、支氣管炎具有十分良好的效果。

野馬追含黃酮類、生物堿、萜類、有機酸、香豆素和揮發油等有效成分；目前關于野馬追的質量檢測方法，僅僅采用常規的HPLC測量其含有的3至5種成分，另外目前有關GC-MS檢測野馬追揮發油成分的報道，但是任然未能全面檢測其有效成分的含量，不能全面、客觀的評價野馬追的質量。

因此，為了充分控制好野馬追藥材及其提取物及其制劑的臨床安全性，很有必要在現有技術的基礎之上，研究設計出能準確全面檢測野馬追有效成分的檢測方法。

發明內容

發明目的：本發明的目的是解決現有技術的不足，經過大量實驗篩選，采用超高效液相色譜聯用質譜檢測野馬追的質量。本發明通過大量實驗篩選流動相組成，色譜圖，洗脫方式，質譜檢測條件等關鍵色譜條件。該檢測方法可以同時檢測野馬追中的黃酮、萜內酯、酚酸、生物堿、香豆素5類成分，共21種不同的活性化合物。該方法檢測靈敏度高，穩定性好，可以客觀、全面、準確地評價野馬追藥材的質量，對控制質量和保證療效具有重要意義。

技術方案：為了實現以上目的，本發明采取的技術方案為：

一種野馬追的質量檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)供試品溶液的制備

精密稱取野馬追，加入乙醇提取，得提取液，過濾，取續濾液過0.22μm濾膜，得供試品溶液；

(2)混合對照品溶液的制備

精密稱定野馬追內酯A、野馬追內酯B、野馬追內酯F、野馬追內酯K、野馬追內酯H、蘆丁、槲皮素、山柰酚、金絲桃苷、異鼠李素、木犀草素、蒲公英甾醇乙酸酯、偽蒲公英甾醇、偽蒲公英甾醇、東莨菪內酯、6,7-二甲氧基香豆素，綠原酸、新綠原酸、隱綠原酸、澤蘭葉黃素、異澤蘭黃素對照品置于量瓶中，用甲醇溶解稀釋，制得混合對照品儲備液；于4℃保存，備用；

(3)線性回歸方程的建立

取步驟(2)的混合對照品溶液依次稀釋1、2、3、4和5倍，得到系列濃度的混合對照品溶液，依次注入超高效液相色譜儀，以系列對照品濃度作為橫坐標X，對應的峰面積為縱坐標Y，對各化學成分進行線性回歸分析并，計算線性回歸方程；

步驟(4)含量測定

取步驟(1)的野馬追供試品溶液注入超高效液相色譜儀進行分析，將峰面積代入步驟(3)的線性回歸方程，計算供試品溶液中21種成分的含量。

作為優選方案，以上所述的野馬追的質量檢測方法，步驟(1)供試品溶液的制備方法為精密稱取野馬追20g，加入乙醇100ml提取，采用超聲法、回流提取法或連續回流提取法進行提取1～3次，每次0.5～2小時，合并提取液，過濾，取續濾液過0.22μm濾膜，得供試品溶液。

更加優選，精密稱取野馬追20g，加入乙醇100ml提取，采用連續回流提取法進行提取3次，每次1小時，合并提取液，過濾，取續濾液過0.22μm濾膜，得供試品溶液。