[發明專利]一種人源化抗Grb2單克隆抗體、及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 201910796374.1
• 申請日: 2019-08-27
• 公開（公告）號: CN110563841A
• 公開（公告）日: 2019-12-13
• 發明（設計）人: 楊瀾;舒雄
• 申請（專利權）人: 楊瀾
• 主分類號: C07K16/18
• 分類號: C07K16/18;C12N15/13;C12N15/85;C12N5/10;A61K39/395;A61P35/00
• 代理公司: 11212 北京輕創知識產權代理有限公司
• 代理人: 馮瑛琪

本發明公開了一種人源化抗Grb2單克隆抗體、及其制備方法和應用，屬于醫藥技術領域。所述人源化抗Grb2單克隆抗體，包括輕鏈互補決定區和重鏈互補決定區，所述輕鏈互補決定區的氨基酸序列如SEQ ID NO.1?3所示，所述重鏈互補決定區的氨基酸序列如SEQ ID NO.4?6所示。本發明還公開了一種人源化抗Grb2單克隆抗體的制備方法及其應用。本發明提供的人源化抗Grb2單克隆抗體，除了具有與Grb2蛋白、Grb2陽性腫瘤細胞結合的特異性外，還具有人源性，可降低人用的毒副作用。

技術領域

本發明涉及一種人源化抗Grb2單克隆抗體、及其制備方法和應用，屬于醫藥技術領域。

背景技術

自上世紀80年代以來，腫瘤已逐漸成為全球范圍內對人類健康和生命威脅最大的惡性疾病。近二十年來隨著中國經濟社會發展和人民生活水平提高，惡性腫瘤在中國的發病率呈持續上升趨勢。化療、新輔助化療和手術仍是目前多數實體腫瘤臨床治療的主要策略。自2001年以來，腫瘤分子靶向治療為實體腫瘤的治療打開了全新的視野。分子靶向腫瘤藥物(Molecularly targeted cancer therapy)通常采用單克隆抗體或小分子物質阻斷腫瘤發病機制中特有的信號傳導通路或分子，減少治療帶來的副作用，提高了安全性。目前特異性針對受體酪氨酸激酶為靶點(EGFR、HER2、VEGF、PDGF等)的藥物已在臨床取得了可觀的療效。例如，表皮生長因子受體(epidermal growth factor receptor,EGFR)阻斷劑吉非替尼(易瑞沙)和受體酪氨酸激酶抑制劑(Tyrosine kinase inhibitor，TKI)厄洛替尼(特羅凱)已廣泛用于肺癌的臨床治療；anti-EGFR單克隆抗體Cetuximab(西妥昔單抗，商品名：愛必妥)、Panitumumab(帕尼單抗，商品名：Vectibix)也已作為轉移性結直腸癌晚期患者重要的靶向治療藥物。

盡管靶向藥物給結直腸癌患者長期生存帶來了希望，但Cetuximab和Panitumumab單藥治療的響應率僅為8-13％，與結直腸癌主要化療方案FOLFOX和FOLFIRI聯合用藥，其有效率較常規化療方案相比僅提高約16％。即使是初期對anti-EGFR mAb高度敏感的患者，在經過12-18m中位無進展期治療后，也幾乎難逃獲得性耐藥的厄運。靶向治療耐藥是阻礙結直腸癌患者生存持續獲益的最大障礙。因此，如何幫助靶向EGFR治療耐藥的患者再次從靶向藥物中獲益是目前結直腸癌治療領域亟待解決的關鍵問題。

生長因子受體結合蛋白(Growth factor receptor bound protein2，簡稱Grb2)是一種在諸多細胞中廣泛表達的銜接蛋白，由217個氨基酸組成,其分子量約為25kDa。Grb2蛋白結構的最大特點是含有一個位于中央的SH2結構域和兩個位于兩側的SH3結構域。SH2和SH3之間由兩條柔性的臂鏈相互連接起來。兩條柔性臂鏈賦予Grb2更大的空間結構變化。Grb2通過調控受體酪氨酸激酶(Receptor tyrosine kinase，RTK)信號通路來調節細胞功能。現已明確Grb2不僅作為主要信號傳導分子在胃癌、結直腸癌、食管鱗狀細胞癌、宮頸癌等多種腫瘤組織中高表達，其表達水平還與腫瘤的淋巴結轉移及預后密切相關。Grb2的異常表達或其所在信號通路的異常活化將減弱腫瘤細胞間或腫瘤細胞與細胞外基質間的黏附、降低胞外基質結構的穩定性、增強細胞骨架的柔韌性和細胞的遷移能力，促進腫瘤血管生成。鑒于Grb2具有重要的病理生理功能，根據Grb2結構特點，涉及篩選針對Grb2的特異性化合物和多肽一直是腫瘤研究的熱點。但目前開發的抗Grb2小分子藥物遠遠不能滿足臨床治療需求。