[發明專利]一種新型的測定生物樣品中醛酮化合物的衍生化方法

在審

• 申請號: 201910795903.6
• 申請日: 2019-08-27
• 公開（公告）號: CN110551143A
• 公開（公告）日: 2019-12-10
• 發明（設計）人: 李舒偉
• 申請（專利權）人: 南京譜利健生物技術有限公司
• 主分類號: C07D495/04
• 分類號: C07D495/04;G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 32206 南京眾聯專利代理有限公司
• 代理人: 李雪萍

1.一種新型的衍生化試劑，其特征在于：衍生化試劑包括以下三部分：1)一個能夠與羰基進行特異性反應形成共價鍵的氨氧基官能團；2)一個能夠被光裂解的生物素基團用于標記后的醛酮化合物的親和富集；3)一個含有穩定同位素標記的同量異位標簽用于醛酮化合物的定量分析。

2.如權利要求1所述的一種新型的衍生化試劑，其特征在于：所述新型的衍生化試劑包括2～10個化學結構完全相同的分子，在每個分子中的同量異位標簽的不同位置處含有13C或15N同位素。

3.如權利要求2所述的一種新型的衍生化試劑，其特征在于：所述同量異位標簽的結構包括報告基團和平衡基團，其中報告基團和平衡基團是通過MS/MS可剪切鍵連接；所述同量異位標簽的每個報告基團的質量是不同的，報告基團的不同質量被平衡基團所補償，每個試劑中的報告基團加平衡基團的質量是相同的。

4.如權利要求2所述的一種新型的衍生化試劑，其特征在于：報告基團和平衡基團通過質譜MS/MS可剪切鍵連接，在串聯質譜分析中被切斷所形成的報告離子的強度用來定量分析。

5.如權利要求1或2所述的一種新型的衍生化試劑，其特征在于：所述衍生化試劑為包括10個分子的衍生化試劑，結構包括CILAT-10Plex114、CILAT-10Plex115C、CILAT-10Plex116C、CILAT-10Plex117C、CILAT-10Plex118C、CILAT-10Plex119、CILAT-10Plex115N、CILAT-10Plex116N、CILAT-10Plex117N、CILAT-10Plex118N；10個分子衍生化試劑的結構如下式：

6.如權利要求1或2所述的一種新型的衍生化試劑，其特征在于：所述衍生化試劑為包括兩個分子的衍生化試劑，結構包括CILAT-2Plex114和CILAT-2Plex115兩個分子；CILAT-2Plex114的位置1是¹³C,位置2是¹⁴N，CILAT-2Plex115的位置1是¹²C,位置2是¹⁵N；報告離子的質荷比分別為114.12和115.12，

衍生化試劑的結構如下式：

7.一種新型的衍生化試劑的應用，所述衍生化試劑用于測定生物樣品中醛酮化合物的定性定量分析。

8.采用權利要求1-6所述的任意一種新型的衍生化試劑測定生物樣品中醛酮化合物的衍生化方法，其特征在于：衍生化試劑分別和待測樣品中的醛酮化合物反應后，混合在一起，然后利用生物素和鏈霉親和素蛋白之間的強作用力富集含有同量異位標簽的分子，最后用紫外光把生物素部分切斷，產生的分子可以用高分辨質譜LC-MS/MS進行分析。

9.一種新型的衍生化試劑的應用，所述衍生化試劑用于測定一個生物樣品中醛酮化合物的絕對含量。

10.如權利要求9所述的一種新型的衍生化試劑的應用，其特征在于：所述衍生化試劑的結構包括CILAT-2Plex114和CILAT-2Plex115兩個分子，衍生化試劑用于測定一個生物樣品中醛酮化合物的絕對含量的方法為：CILAT-2Plex115標記生物樣品中的醛酮化合物，CILAT-2Plex116標記相應的經過精確測定濃度的醛酮化合物的標準品。